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融合基因Mdc-hly的构建及原核表达

卢雪梅;金小宝;朱家勇;梅寒芳;马艳;王艳;李小波;褚夫江;   

  1. 广东药学院基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室;
  • 出版日期:2010-04-26 发布日期:2010-04-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(30671832)

  • Published:2010-04-26 Online:2010-04-26

摘要: 构建家蝇天蚕素-人溶菌酶(Mdc-hly)融合基因,实现Mdc-hly基因在大肠杆菌中的表达。通过RT-PCR分别扩增出家蝇天蚕素和人溶菌酶的成熟肽基因序列,再利用Gene-SOEing技术构建融合基因,将融合基因克隆至pET32a表达载体,转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导得到高效表达,融合蛋白分子量约为38kD。Western blotting杂交证实了表达蛋白的抗原活性。成功构建了融合其因并进行了原核表达,为进一步的生物活性研究打下基础。

关键词: 家蝇天蚕素, 人溶菌酶, Gene-SOEing, 原核表达