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猪卵泡液样品制备方法对双向电泳图谱的影响

孙艳玲;周虚;李晓艳;王兴龙;李成娇;   

  1. 吉林大学畜牧兽医学院;军科院军事兽医研究所;
  • 出版日期:2010-05-26 发布日期:2010-05-26
  • 基金资助:
    国家科技支撑项目(2006BAD14B08-01);; 国家自然科学基金项目(30671511)

  • Published:2010-05-26 Online:2010-05-26

摘要: 比较不同的蛋白制备方法,寻找适合猪卵泡液的双向电泳样品制备方法,提高2-DE图谱的分辨率和重复性。利用ProteoExtract Albumin/IgG Remove Kit去除卵泡液中的高峰度蛋白;然后分别用丙酮沉淀法、TCA/丙酮沉淀法和超滤法进行样品浓缩,比较分析对2-DE图谱的影响。结果表明,TCA/丙酮沉淀法制备的蛋白样品获得的电泳图谱质量较好,蛋白斑点数目较多,斑点较清晰、圆滑,分辨率较高,重复性较好。TCA-丙酮沉淀法更适合于制备猪卵泡液的双向电泳蛋白样品,为进一步对猪卵泡液2-DE图谱进行分析、鉴定及寻找生物标记物提供了保证。

关键词: 卵泡液, 蛋白, 制备方法, 双向电泳