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BSP基因RNA干扰对乳腺癌MDA-MB-231BO细胞生物学特性的影响

燕慧;王捷;杨自飞;张宏斌;夏冰;冼江;王江涛;   

  1. 华南理工大学生物科学与工程学院;广州军区广州总医院医学实验科;
  • 出版日期:2010-06-26 发布日期:2010-06-26
  • 基金资助:
    广东省自然科学基金重点项目(06104396)

  • Published:2010-06-26 Online:2010-06-26

摘要: 旨在研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)基因表达后对人乳腺癌细胞MDA-MB-231BO生物学特性的影响。应用pSilencer5.1-U6Retro构建针对BSP基因的siRNA逆转录病毒重组表达质粒,将重组质粒转染293细胞制备病毒悬液感染MDA-MB-231BO细胞,利用嘌呤霉素筛选抑制BSP表达的乳腺癌细胞。Western blotting检测细胞内BSP蛋白表达,采用MTT法和集落形成试验检测细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果显示,成功构建BSP基因RNAi稳定转染的231BO-BSP27细胞。231BO-BSP27细胞内BSP蛋白表达抑制率为69.3%,与对照组细胞相比,231BO-BSP27细胞的生长速率和克隆形成率明显降低;S期细胞数量明显减少,G0/G1期细胞增多。由此证实,逆转录病毒介导的RNAi能实现BSP基因稳定沉默,从而抑制MDA-MB-231BO细胞的生长和增殖。

关键词: 骨唾液酸蛋白, RNA干扰, 增殖, 细胞周期