番茄LeDREB1转录因子基因RNAi载体的构建和鉴定

番茄LeDREB1转录因子基因RNAi载体的构建和鉴定

王迎波;单曙光;王贺;王磊;白由路;程宪国;

中国农业科学院农业资源与农业区划研究所;

出版日期:2010-09-26 发布日期:2010-09-26

Published:2010-09-26 Online:2010-09-26

摘要/Abstract

摘要： 利用rd29A基因启动子的DRE元件从番茄(丽春)cDNA文库中通过酵母单杂交技术筛选得到转录因子基因LeDREB1。核苷酸序列测定结果表明,该基因片段全长1 782 bp,具有900 bp的cDNA开放阅读框序列,编码300个氨基酸。该基因属于AP2/EREBP家族[1],可能调控许多逆境应答基因的表达。运用RNA干扰的思路,设计特异性引物,扩增正向和反向基因片段。将LeDREB1正向+反向基因片段插入到pCAMBIA2300-OCS的35s启动子下游,构建干扰载体pCAM-RNAi-LeDREB1,通过酶切和测序鉴定证明目的片段与载体片段连接正确。这一载体的成功构建为进一步研究LeDREB1的功能和调控作用机制提供有效的材料与技术支撑。

关键词: LeDREB1, 转录因子, 载体构建, siRNA, 番茄

王迎波;单曙光;王贺;王磊;白由路;程宪国;. 番茄LeDREB1转录因子基因RNAi载体的构建和鉴定[J]. .

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