]*>","")" /> 大肠杆菌甘露糖异构酶(MI)基因克隆及功能研究

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大肠杆菌甘露糖异构酶(MI)基因克隆及功能研究

高小倩;张春晓;陈晓波;王丽丽;仪宏;   

  1. 河北科技大学生物科学与工程学院;
  • 出版日期:2010-11-26 发布日期:2010-11-26
  • 基金资助:
    国家科技支撑计划项目(2007BAI26B01)

  • Published:2010-11-26 Online:2010-11-26

摘要: 甘露糖异构酶(EC5.3.1.7,Mannose isomerase,简称MI)能够催化果糖和甘露糖之间的异构转化。甘露糖加氢催化形成甘露醇,因此甘露糖异构酶的研究为工业生产甘露糖和甘露醇提供了新的可能途径。本研究以Escherichia coliJM109基因组DNA为模板,PCR扩增mi基因。结果表明,所克隆的mi基因与E.colistr.K-12substr.MG1655的MI基因序列一致性为99.9%,氨基酸序列一致性为99%。该基因能够在E.coliBL21(DE3)中进行高效诱导表达,诱导出51.4kD的特异性融合蛋白。酶学研究表明,该酶最适反应温度为37℃,最适pH为7.5,甘露糖为最佳反应底物,反应平衡时果糖与甘露糖的比值约为2.7。

关键词: 甘露糖异构酶, 克隆, 原核表达, 酶活