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蔓地亚红豆杉3′-N-去苯甲酰-2-脱氧紫杉醇苯甲酰转移酶基因的克隆与序列分析

黄仕杰;程抒劼;郭心悦;郭丽琼;林俊芳;   

  1. 华南农业大学食品学院;华南农业大学生物质能研究所;福建农林大学食品学院;
  • 出版日期:2010-12-26 发布日期:2010-12-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(30671457,30871768);; 国家“863”资助项目(2006AA10Z301)

  • Published:2010-12-26 Online:2010-12-26

摘要: 3′-N-去苯甲酰-2-脱氧紫杉醇苯甲酰转移酶(DBTNBT)是催化紫杉醇生物合成最后一步反应所需要的酶,负责将带有不完全侧链的紫杉醇前体催化形成紫杉醇。利用蔓地亚红豆杉的总DNA和总RNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术克隆出DBTNBT基因的DNA序列和cDNA序列,测序结果显示长度分别为1465bp和1362bp,编码438个氨基酸的多肽。同源性比较分析结果表明,其碱基序列与已经报道的蔓地亚红豆杉的DBTNBT基因的一致性为99%,其氨基酸序列与已经报道的蔓地亚红豆杉的DBTNBT氨基酸序列的一致性为96%。DNA序列和cDNA序列比对发现该基因含有1个内含子。利用SWISS-PROT、DNAMAN等生物信息学工具对其蛋白序列进行了分析,为利用基因工程的方法生产紫杉醇或其前体物质提供了分子基础。

关键词: 蔓地亚红豆杉, 紫杉醇, 3′-N-去苯甲酰-2-脱氧紫杉醇苯甲酰转移酶, 基因克隆, 序列分析