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血管紧张素转换酶的克隆及序列分析

刘淑集;单超;吴成业;王宗华;王茵;刘智禹;   

  1. 福建省水产研究所;福建农林大学食品科学学院;福建农林大学生命科学学院;
  • 出版日期:2011-01-26 发布日期:2011-01-26
  • 基金资助:
    福建省自然科学基金项目(2008J0251)

  • Published:2011-01-26 Online:2011-01-26

摘要: 根据GenBank上公布的小鼠血管紧张素转换酶(ACE)基因序列,经多重比较设计1对特异性引物,从小鼠Balb/c肺部组织中提取总RNA,进行RT-PCR。产物经纯化回收,克隆到pMD-18T载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,检测阳性克隆、测序并进行序列分析。测序结果显示,该片段全长4 023 bp,开放阅读框(ORF)包含3 985 bp,编码1 328个氨基酸,相对分子质量为152.77 kD,等电点6.35。此序列与GenBank已登录的小鼠ACE同源性达99%,差异的5个碱基位于基因的非关键部位,说明小鼠ACE成功克隆。经同源性比较分析,达50%以上相同性的物种有17个,且符合种属之间的进化关系。因此,该序列可于研究物种亲缘关系或遗传距离的理想标记,为下一步研究其在酵母中的表达、生物活性和应用奠定了一定的基础。

关键词: 血管紧张素转换酶, 克隆, 序列分析