血管钠肽(VNP)在大肠杆菌中的表达、纯化及活性分析

血管钠肽(VNP)在大肠杆菌中的表达、纯化及活性分析

李鹏;于军;陈健康;陈蕴;房聪;邱爽;丁月娣;金坚;

江南大学医药学院药物设计与分子药理学实验室;第四军医大学基础部生理学教研室;

出版日期:2011-05-26 发布日期:2011-05-26
基金资助:
国家重大新药创制资助课题(2009ZX09103)

Published:2011-05-26 Online:2011-05-26

摘要/Abstract

摘要： 利钠肽家族成员在维持机体心血管平衡等方面发挥着重要的生理作用。人工设计的新型利钠肽分子血管钠肽(VNP)由C-型利钠肽和A-型利钠肽的功能结构域嵌合组成,具备两种利钠肽分子的优势功能。采用分子生物学方法,构建了BL21(DE3)/pGEX-4T-1-VNP原核表达系统,在大肠杆菌中实现了融合蛋白GST-VNP的可溶性表达。经离心、超声波破碎、GST亲和层析、G25凝胶过滤和肠激酶酶切后超滤离心便可获得电泳纯的目的产物VNP,最终每升发酵液可获得20 mg重组VNP蛋白。大鼠离体血管环张力法和去膀胱尿液收集法活性评价显示,VNP具有扩张血管和利尿双重功效。

关键词: 血管钠肽, 利钠肽, 融合蛋白, 纯化, 活性

李鹏;于军;陈健康;陈蕴;房聪;邱爽;丁月娣;金坚;. 血管钠肽(VNP)在大肠杆菌中的表达、纯化及活性分析[J]. .

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