决明查尔酮合成酶全长cDNA的克隆及其原核表达载体的构建

决明查尔酮合成酶全长cDNA的克隆及其原核表达载体的构建

方袁梦梦;崔润泽;陈访访;周嘉裕;廖海;

西南交通大学生命科学与工程学院;

出版日期:2011-06-26 发布日期:2011-06-26
基金资助:
教育部中央高校基本科研业务费专项资金(SWJTU09ZT28,SWJTU09CX065);;西南交通大学“希望之星”,西南交通大学科技发展项目(2008B06)

Published:2011-06-26 Online:2011-06-26

摘要/Abstract

摘要： 从决明子叶中提取查尔酮合成酶(Chalcone synthase)总RNA,经过RT-PCR获得查尔酮合成酶cDNA,纯化后与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌Top10,获得了查尔酮合成酶全长基因序列。序列测定表明,查尔酮合成酶全长核苷酸长度为1173 bp,编码390个氨基酸。与GenBank中已发表序列EU430077进行比较,核苷酸同源性为100%。将该基因片段克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a(+)/Chalcone synthase,所获重组质粒经过双酶切、PCR和序列测定,证实含有目的片段,且连接、构建正确,为查尔酮合成酶的进一步表达奠定了基础。

关键词: 决明, 查尔酮合成酶, 克隆, 原核表达载体, 构建

方袁梦梦;崔润泽;陈访访;周嘉裕;廖海;. 决明查尔酮合成酶全长cDNA的克隆及其原核表达载体的构建[J]. .

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