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绿色糖单孢菌木质素过氧化物酶的分离纯化及鉴定

丁梦璇;刘炳梅;张国庆;翟楠;谢响明;王贺祥;   

  1. 北京林业大学生命科学与技术学院;中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室;
  • 出版日期:2011-08-26 发布日期:2011-08-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(30870028);;北京市优秀博士论文指导项目科技项目(YB20091002201)

  • Published:2011-08-26 Online:2011-08-26

摘要: 木质素过氧化物酶是一种重要的具有工业应用前景的木质素降解酶,但已报道真菌来源的木质素过氧化物酶只能在酸性低温条件下发挥作用,限制了其进一步的工业应用。通过培养一株耐热耐碱放线菌——绿色糖单孢菌发酵产酶,采用DEAE-Cellulose,CM-Cellulose和Superdex 75凝胶过滤层析等分离纯化方法,得到一种具有耐热耐碱特性的木质素过氧化物酶。经凝胶电泳检测其为单一蛋白,分子量为41kD。最终纯化倍数达到20倍,活性回收率为6%。采用LTQ法对纯酶进行蛋白质归类鉴定,得到其部分氨基酸片段,为该酶的进一步分子生物学研究奠定基础。

关键词: 绿色糖单孢菌, 耐热耐碱, 木质素过氧化物酶, 分离纯化, 蛋白质鉴定