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Wistar大鼠Pdia3 cDNA的克隆及原核表达

乌吉斯古冷;汤睿智;邢万金;   

  1. 内蒙古大学生命科学学院;
  • 出版日期:2011-09-26 发布日期:2011-09-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(30960174);;

  • Published:2011-09-26 Online:2011-09-26

摘要: 哺乳动物的精卵融合是一个多分子参与的复杂过程,目前只鉴定出几种影响精卵融合的蛋白因子,对其分子机制还知之甚少。其中位于精子上的Pdia3具有二硫键异构酶活性,可能催化其他精卵融合相关蛋白的二硫键变化而参与精卵膜融合。克隆了Wistar大鼠的Pdia3 cDNA片段,长度为1 620 bp,其中编码区为1 518 bp。测序结果显示,编码区内有两个碱基与GenBank公布的大鼠Pdia3 cDNA不同,分别为第147个密码子GAG(Glu)的第1位碱基和第410个密码子AAG(Lys)的第3位碱基,前者造成氨基酸替换,后者仅为多态性。此外,还在大肠杆菌中成功地表达并纯化了GST-Pdia3融合蛋白,为下一步研究大鼠Pdia3在体外影响精卵融合和与其它蛋白的相互作用奠定了基础。

关键词: Wistar大鼠, Pdia3, cDNA克隆, 原核表达