]*>","")" /> 家蚕核型多角体病毒BmNPV囊膜蛋白P74膜外区克隆和原核表达

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家蚕核型多角体病毒BmNPV囊膜蛋白P74膜外区克隆和原核表达

李国辉;唐琦;胡朝阳;陈慧卿;   

  1. 江苏大学生命科学研究院;
  • 出版日期:2011-10-26 发布日期:2011-10-26
  • 基金资助:
    校科研启动基金项目(09JDG057)

  • Published:2011-10-26 Online:2011-10-26

摘要: 通过PCR扩增家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)囊膜蛋白p74基因膜外区片段,对切胶纯化得到的DNA目的片段与原核表达载体pET28a进行连接,通过不同浓度的IPTG对含有pET28a-p74重组质粒的大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导,对诱导产物进行SDS-PAGE电泳。结果表明p74基因膜外区获得了表达;通过His单抗对原核表达产物进行Western blotting分析,其结果证实诱导蛋白带为融合有组氨酸的目的蛋白。对割胶获得的P74蛋白和免疫佐剂进行充分研磨,以研磨后的匀浆液对昆明小鼠进行皮下多点注射,通过收获的抗血清对BmNPV ODV病毒粒子进行West-ern blotting分析,检测到一条分子量大小为74 kD的特异杂交带,表明获得的多抗可用于P74蛋白功能的进一步研究。

关键词: 家蚕核型多角体病毒, p74基因, P74蛋白, 原核表达, 抗体制备