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制备高效大肠杆菌电转化感受态细胞和电转化条件的研究

朱森康;黄磊;李燕飞;钟卫鸿;徐志南;   

  1. 浙江工业大学生物与环境工程学院;浙江大学化学工程与生物工程学系;浙江工业大学药学院;
  • 出版日期:2011-10-26 发布日期:2011-10-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(21006088);;

  • Published:2011-10-26 Online:2011-10-26

摘要: 旨在建立一种高效大肠杆菌电转化感受态细胞的制备方法,研究了摇瓶装液量,菌体生长阶段,转化电场强度,转化后复苏时间以及感受态细胞存放时间等对转化效率的影响。结果表明,装液量为400 mL/2 L,菌体在OD600值为0.452时收集所制备的感受态细胞,在电场强度12.5 kV/cm条件下电击5 ms,转化后复苏时间2 h,转化效率可达到1010CFU/μg DNA。此条件下制备的感受态细胞转化效率高,质量稳定,重复性好。

关键词: 大肠杆菌, 电转化, 感受态细胞, 转化效率