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水牛精子蛋白质组双向电泳体系的建立和优化

薛雯;杨丽;付强;刘振方;张明;卢克焕;   

  1. 广西大学动物繁殖研究所亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室;广西桂林解放军第181医院肾脏科;
  • 出版日期:2012-01-26 发布日期:2012-01-26
  • 基金资助:
    广西自然科学基金项目(0991047);;

  • Published:2012-01-26 Online:2012-01-26

摘要: 建立和优化一种适合水牛精子蛋白质组学研究的双向电泳技术。以水牛精子为研究对象,比较两种不同配方的裂解液,以及不同上样量对其2-DE图谱质量的影响。结果显示,以7 mol/L尿素、2 mol/L硫脲、4%CHAPS、1%DTT、0.5%Cocktail of protease inhibitors为裂解液,24 cm胶条上样量200μg时,可获得较好的精子总蛋白质2-DE图谱。运用ImageMaster 2-Dplatinum分析软件检测出约500个蛋白质点,蛋白质大部分分布在等电点5-7之间,分子量范围约40-90 kD。

关键词: 水牛, 精子, 双向电泳, 蛋白质组学, 裂解液