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基因敲除提高大肠杆菌工程菌生产异丁醇产量的研究

郭媛;林丽华;郭玲;庞浩;彭建新;黄日波;   

  1. 广西科学院非粮生物质酶解国家重点实验室 国家非粮生物质能源工程技术研究中心 广西生物炼制重点实验室;
  • 出版日期:2012-07-26 发布日期:2012-07-26
  • 基金资助:
    广西科学院基本科研业务费(11YJ24SW03,10YJ25SW09)

  • Published:2012-07-26 Online:2012-07-26

摘要: 探究pflB、frdAB、fnr和AdhE四基因缺失突变株对大肠杆菌工程菌发酵生产异丁醇的影响。运用Red重组系统敲除大肠杆菌BW25113的pflB、frdAB、fnr和AdhE基因,构建pflB、frdAB、fnr和AdhE四基因缺失突变株E.coliBW25113H,结合本实验室已经构建的表达质粒pSTV29-alsS-ilvC-ilvD-kdcA,并检测该工程菌在1L发酵罐的发酵过程中的生物量、突变菌株的稳定性、异丁醇产量及有机酸含量的变化情况。成功获得pflB、frdAB、fnr和AdhE四基因缺失突变株BW25113H。发酵结果表明,该工程菌能以较长时间,较高比生长速率保持对数生长期,其稳定性较好,异丁醇产量增加了40%。成功构建pflB、frdAB、fnr和AdhE四基因缺失突变株BW25113H,结合非自身发酵途径使异丁醇的产量由3 g/L提升至4.2 g/L。

关键词: 大肠杆菌工程菌, 基因敲除, 异丁醇, 非发酵途径, Red重组系统