脂肪酶活力测定方法及其在筛选产脂肪酶微生物中的应用

生物技术通报 ›› 2013, Vol. 0 ›› Issue (1): 203-208.

• 研究报告 • 上一篇

脂肪酶活力测定方法及其在筛选产脂肪酶微生物中的应用

王欢^1,2，何腊平^3,4,周换景^1,2，张义明¹ ,李翠芹² ,陶菡^1,2

1. 贵州省发酵工程与生物制药重点实验室，贵阳 550025 ；2. 贵州大学化学与化工学院，贵阳 550025 ；3. 贵州大学生命科学学院，贵阳 550025 ；4. 贵州省农畜产品贮藏与加工重点实验室，贵阳 550025

收稿日期:2012-10-29 修回日期:2013-01-31 出版日期:2013-01-30 发布日期:2013-01-30
作者简介:王欢，女，硕士研究生，研究方向：发酵工程；E-mail: huan9955@163.com
基金资助:
国家自然科学基金项目（21062004），贵州省优秀科技教育人才省长专项基金项目［黔省专合字（2010）10 号］，国家自然科学基金项目（31160002，C010101）

Determination Methods for Lipase Activity and Its Application in the Screening of Microbial Lipase

Wang Huan^1,2,He Laping^3,4,Zhou Huanjing^1,2,Zhang Yiming¹, Li Cuiqin², Tao Han^1,2

1. Guizhou Province Key Laboratory of Fermentation Engineering and Biopharmacy，Guiyang 550025;
2. School of Chemistry and Chemical Engineering，Guizhou University，Guiyang 550025;
3.College of Life Sciences，Guizhou University，Guiyang 550025 ；4. Key Laboratory of Agricultural and Animal Products Store & Processing of Guizhou Province，Guiyang 550025

Received:2012-10-29 Revised:2013-01-31 Published:2013-01-30 Online:2013-01-30

摘要/Abstract

摘要： 比较了罗丹明平板法、橄榄油乳化法、对硝基苯酚法测脂肪酶水解酶活和对硝基苯酚法测脂肪酶酯合成酶活4 种常用的脂肪酶活力测定方法。结果表明，罗丹明平板法只适合脂肪酶活力的定性和初步定量判断，后3 种方法适合于脂肪酶活力的定量检测，但只有对硝基苯酚法有较好的重现性。而且，脂肪酶水解酶活力和其合成活力无对应关系，所以在筛选产脂肪酶微生物时要选择合适的脂肪酶活力测定方法。也即，筛选产水解酶活的菌株应选择水解酶活测定方法，否则，选择酯合成酶活力测定方法。基于这一原则筛选到了预期产脂肪酶微生物。

关键词: 脂肪酶 , 水解酶活力 , 酯合成酶活力 , 测定方法 , 筛选

Abstract: Four common lipase activity determination methods including Rhodamine B plate, olive oil emulsification, ρ-NPP for lipasehydrolytic activity and ρ-NPP for lipase synthetic activity were compared. The result showed that the Rhodamine B plate method was suitable forthe qualitative and preliminary quantitative estimate of lipase activity and the other three methods were suitable for the quantitative determinationof lipase activity but only the ρ-NPP method has a good reproducibility. Moreover, there is no relationship between the hydrolytic activity andsynthetic activity of lipase. So lipase activity determination method should be chosen in screening the lipase-produced microbial. Namely,hydrolytic activity determination methods should be chosen in screening the hydrolytic lipase-produced microbial, otherwise, ester synthetaseactivity assay should be used. Based on the principle, desired lipase-produced microbial were screened.

Key words: Lipase , Hydrolytic activity , Synthetic activity , Determination methods , Screening

王欢, 何腊平, 周换景, 张义明, 李翠芹, 陶菡. 脂肪酶活力测定方法及其在筛选产脂肪酶微生物中的应用[J]. 生物技术通报, 2013, 0(1): 203-208.

Wang Huan, He Laping, Zhou Huanjing, Zhang Yiming, Li Cuiqin, Tao Han. Determination Methods for Lipase Activity and Its Application in the Screening of Microbial Lipase[J]. Biotechnology Bulletin, 2013, 0(1): 203-208.

参考文献

[1] Cardenas F，de Castro MS，Sanchez-Montero JM，et al. Novelmicrobial lipase：catalytic activity in reactions in organic media[J].Enzyme and Microbial Technology，2001，28（2-3）：145-154.
[2] Kretza E，Papaneophytou CP，Papi RM，et al. Lipase activityin Thermus thermophilus HB8 ：Purification and characterizationof the extracellular enzyme[J]. Biotechnology and BioprocessEngineering，2012，17 ：512-525.
[3] Kouker G，Jaeger KE. Specific and sensitive plate assay forbacterial lipases. Appl Environ Microbiol，1987，53（1）：211-213.
[4] 周晓云. 酶技术[M]. 北京：石油工业出版社，1995 ：287-291.
[5] 高修功. 微生物脂肪酶生产及非水相催化性质与应用的研究[D]. 浙江：无锡轻工大学，1995 ：28-29.
[6] 郑小梅. 脂肪酶产生菌的筛选及其脂肪酶基因的克隆[D]. 北京：中国农业科学院，2009 ：23-24.
[7] 江慧芳，王雅琴，刘春国. 三种脂肪酶活力测定方法的比较与改进[J]. 化学与生物工程，2007，24（8）：72-75.
[8] Margesin R，Feller G，Hammerle M，et al. A colorimetric methodfor the determination of lipase activity in soil[J]. BiotechnologyLetters，2002，24 ：27-33.
[9] 滕云. 酯合成脂肪酶高产菌的选育及其产酶发酵调控的研究[D]. 浙江：江南大学，2008 ：18-19.
[10] 谢红想. 有机相中芳香酯合成用脂肪酶产生菌的筛选及其应用[D]. 浙江：无锡轻工业大学，1998.
[11] 刘虹蕾，缪铭，江波，等. 微生物脂肪酶的研究与应用[J].食品工业科技，2012，33（12）：376-381.
[12] Goujard L，Villeneuve P，Barea B，et al. A pectrophotometrictransesterification-based assay for lipase in organic solvent[J].Analytical Biochemistry，2009，385 ：161-167.
[13] Wu XY，Jaaskelainen S，Linko YY. An investigation of crudelipases for hydrolysis，esterification，and transesterification[J].Enzyme and Microbial Technology，1996，19（3）：226-231.

[1]	温晓蕾, 李建嫄, 李娜, 张娜, 杨文香. 小麦叶锈菌与小麦互作的酵母双杂交cDNA文库构建与应用[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 136-146.
[2]	吴巧茵, 施友志, 李林林, 彭政, 谭再钰, 刘利平, 张娟, 潘勇. 类胡萝卜素降解菌株的原位筛选及其在雪茄提质增香中的应用[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 192-201.
[3]	江海溶, 崔若琪, 王玥, 白淼, 张明露, 任连海. NH₃和H₂S降解功能菌的分离鉴定及降解特性研究[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 246-254.
[4]	薛宁, 王瑾, 李世新, 刘叶, 程海娇, 张玥, 毛雨丰, 王猛. 多基因同步调控结合高通量筛选构建高产L-苯丙氨酸的谷氨酸棒杆菌工程菌株[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 268-280.
[5]	陈金行, 张逸, 张军涛, 未本美, 王宏勋, 郑明明. 固定化脂肪酶的创制及其在乙酸肉桂酯无溶剂制备中的应用[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 97-104.
[6]	马俊秀, 吴皓琼, 姜威, 闫更轩, 胡基华, 张淑梅. 蔬菜软腐病菌广谱拮抗细菌菌株筛选鉴定及防效研究[J]. 生物技术通报, 2023, 39(7): 228-240.
[7]	谢东, 汪流伟, 李宁健, 李泽霖, 徐子航, 张庆华. 一株多功能菌株的发掘、鉴定及解磷条件优化[J]. 生物技术通报, 2023, 39(7): 241-253.
[8]	李典典, 粟元, 李洁, 许文涛, 朱龙佼. 抗菌适配体的筛选与应用进展[J]. 生物技术通报, 2023, 39(6): 126-132.
[9]	董聪, 高庆华, 王玥, 罗同阳, 王庆庆. 基于联合策略提高FAD依赖的葡萄糖脱氢酶的酵母表达[J]. 生物技术通报, 2023, 39(6): 316-324.
[10]	李天顺, 李宸葳, 王佳, 朱龙佼, 许文涛. 功能核酸筛选过程中次级文库的有效制备[J]. 生物技术通报, 2023, 39(3): 116-122.
[11]	崔若琪, 张玲悦, 江海溶, 张毓羚, 张明露, 任连海. NH₃和H₂S除臭菌剂的制备及其对厨余垃圾堆肥除臭效果和机理探究[J]. 生物技术通报, 2023, 39(10): 311-322.
[12]	王欣怡, 王晓倩, 王红军, 晁跃辉. FLAG标签纳米抗体的筛选、表达及验证[J]. 生物技术通报, 2023, 39(10): 323-331.
[13]	刘金升, 陈振娅, 霍毅欣, 郭淑元. FACS技术在酶定向进化中的应用[J]. 生物技术通报, 2023, 39(10): 93-106.
[14]	江美彦, 周杨, 刘仁浪, 姚菲, 杨云舒, 侯凯, 冯冬菊, 吴卫. 白芷根际促生菌的筛选及其促生效果研究[J]. 生物技术通报, 2022, 38(8): 167-178.
[15]	王亚军, 司运美. 除磷菌CP-7的筛选及其降解特性研究[J]. 生物技术通报, 2022, 38(7): 258-268.

脂肪酶活力测定方法及其在筛选产脂肪酶微生物中的应用

Determination Methods for Lipase Activity and Its Application in the Screening of Microbial Lipase

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价