栗酒裂殖酵母CDC2基因克隆及淡水舟形藻表达载体构建

生物技术通报 ›› 2013, Vol. 0 ›› Issue (12): 108-112.

栗酒裂殖酵母CDC2基因克隆及淡水舟形藻表达载体构建

刘玉¹ 朱万鹏² 王莹莹² 姬妍茹¹ 张洪升³ 邓军³ 刘宇峰¹

1. 黑龙江省科学院大庆分院生物新技术研究所，大庆 163319
2. 大连工业大学生物工程学院，大连 116034
3. 大庆应用技术研究院，大庆 163316

收稿日期:2013-05-30 出版日期:2013-12-20 发布日期:2013-12-20
作者简介:刘玉，女，博士研究生，助理研究员，研究方向：微藻生物柴油及其基因工程；E-mail：liuyu19830526@qq.com
基金资助:
黑龙江省科学院青年创新基金项目（CX2011G01），大庆市科技计划项目（scyh-2011-76）

Cloning of CDC2 Gene from Schizosaccharomyces pombe and Construction of Freshwater Navicula Expression Vector

LiuYu¹, Zhu Wanpeng², Wang Yingying², Ji Yanru¹, Zhang Hongsheng³, Deng Jun³, Liu Yufeng¹

1. Daqing Branch of Heilongjiang Academy of Sciences，Daqing 163319
2. School of Bioengineering，Dalian Polytechnic University, Dalian 116034
3. Daqing Application Technique Institute，Daqing 163316

Received:2013-05-30 Published:2013-12-20 Online:2013-12-20

摘要/Abstract

摘要：

利用试剂盒提取栗酒裂殖酵母的总DNA，以其为模板进行PCR克隆CDC2 基因，再将pBI121载体质粒和CDC2 基因进行Bam H I和Sma I双酶切，电泳分离和检测，最后连接目的片段构建重组载体pBI121-CDC2。克隆得到长度约为1.2 kb的CDC2 基因片段与NCBI网站所公开的CDC2 基因序列最大同源性达98%，所构建载体经酶切和PCR验证构建成功，并且在淡水舟形藻中得到表达，表明成功构建栗酒裂殖酵母CDC2 基因的淡水舟形藻表达载体。

关键词: 栗酒裂殖酵母, CDC2, 基因, 克隆, 淡水舟形藻, 表达载体, 构建

Abstract:

Total DNA of Schizosaccharomyces pombe was extracted by kit and was used as a template for PCR to clone CDC2 gene. The plasmid pBI121 and CDC2 gene were double-enzyme digested with Bam H I and Sma I, isolated and verified by electrophoresis. At last, the vector of pBI121-CDC2 was constructed by linking the fragments. The 1.2 kb fragment which was obtained by cloning had 98% base similarity to the CDC2 gene of the website NCBI. The vector was digested and used for PCR to identify the successful constrction, and it was also expressed in freshwater Navicula. This showed that the freshwater Navicula expression vector with CDC2 gene was constructed successfully.

Key words: Schizosaccharomyces pombe, CDC2 gene, Clone, Freshwater, Navicula, Expression vector, Construction

刘玉, 朱万鹏, 王莹莹, 姬妍茹, 张洪升, 邓军, 刘宇峰. 栗酒裂殖酵母CDC2基因克隆及淡水舟形藻表达载体构建[J]. 生物技术通报, 2013, 0(12): 108-112.

LiuYu, Zhu Wanpeng, Wang Yingying, Ji Yanru, Zhang Hongsheng, Deng Jun, Liu Yufeng. Cloning of CDC2 Gene from Schizosaccharomyces pombe and Construction of Freshwater Navicula Expression Vector[J]. Biotechnology Bulletin, 2013, 0(12): 108-112.

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