基于重组大肠杆菌无细胞体系生产吡咯喹啉醌

生物技术通报 ›› 2014, Vol. 0 ›› Issue (4): 164-168.

基于重组大肠杆菌无细胞体系生产吡咯喹啉醌

孙继国¹, 韩增叶¹, 葛喜珍², 田平芳¹

(1.北京化工大学生命科学与技术学院，北京 100029；
2.北京联合大学生物化学工程学院，北京 100023)

收稿日期:2013-11-25 出版日期:2014-04-29 发布日期:2014-04-29
作者简介:孙继国，男，硕士研究生，研究方向：微生物代谢工程；E-mail：mishiweilan@126.com
基金资助:
国家自然科学基金项目(21076013)，“973”项目(2012CB725200)

Exploiting Cell-free System of Recombinant E. coli to Synthesize Pyrroloquinoline Quinone

Sun Jiguo¹, Han Zengye¹, Ge Xizhen², Tian Pingfang¹,

(1. College of Life Science and Technology，Beijing University of Chemical Technology，Beijing 100029；
2. College of Biochemical Engineering，Beijing Union University，Beijing 100023)

Received:2013-11-25 Published:2014-04-29 Online:2014-04-29

摘要/Abstract

摘要： 采用无细胞体系生产吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline quinone，PQQ)。首先将肺炎克雷伯氏菌PQQ基因簇pqqABC-DEF置于半乳糖苷酶启动子之下，构建表达载体，经转化筛选获得重组大肠杆菌。制备重组菌的细胞匀浆，体外反应后测定PQQ产量。结果显示，与活体重组菌相比，无细胞体系的PQQ产量提高约30%，表明胞内存在PQQ合成的限速反应，而无细胞体系可解除此限速反应。

关键词: 大肠杆菌, 无细胞体系, 吡咯喹啉醌, 限速反应

Abstract: In this study, cell-free system was developed to overproduce pyrroloquinoline quinone(PQQ). The PQQ gene cluster from Klebsiella pneumoniae was subcloned into vector harboring lac promoter and a recombinant Escherichia coli was acquired. Subsequently cell homogenate was prepared which showed ~30% increase of PQQ yield compared with in vivo biosynthesis. Not only revealing the presence of intracellular velocity-limiting reaction(s)that retards PQQ biosynthesis, this study also suggests that cell-free system can address this issue. Hence, this study provides basis for further enhancement of PQQ production.

Key words: E. coli, Cell-free system, Pyrroloquinoline quinine, Velocity-limiting reaction

孙继国, 韩增叶, 葛喜珍, 田平芳. 基于重组大肠杆菌无细胞体系生产吡咯喹啉醌[J]. 生物技术通报, 2014, 0(4): 164-168.

Sun Jiguo, Han Zengye, Ge Xizhen, Tian Pingfang,. Exploiting Cell-free System of Recombinant E. coli to Synthesize Pyrroloquinoline Quinone[J]. Biotechnology Bulletin, 2014, 0(4): 164-168.

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