生物技术通报 ›› 2015, Vol. 31 ›› Issue (2): 116-121.doi: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.02.017

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青稞HbSnRK2.4的克隆及其序列特征与表达特性分析

曾兴权1,2 王玉林1,2 徐齐君1,2 原红军1,2 韦泽秀2,3 尼玛扎西1,2   

  1. 1. 西藏自治区农牧科学院,拉萨 850002;
    2. 西藏自治区青稞种质改良和牦牛繁育重点实验室,拉萨 850002;
    3.西藏自治区农牧科学院农业资源与环境研究所,拉萨 850002
  • 收稿日期:2014-07-21 出版日期:2015-02-05 发布日期:2015-02-06
  • 作者简介:曾兴权,男,博士,副研究员,研究方向:青稞遗传育种;E-mail:xingquanz_2@126.com
  • 基金资助:
    “973”计划前期研究专项(2012CB723006),国家科技支撑计划(2012BAD03B01,2013BAD30B01),西藏财政专项(2014CZZ001)

Cloning and Characterization of HbSnRK2.4 in Tibetan Hulless Barley(Hordeum vulgareL. var. nudum HK.f.)

Zeng Xingquan1,2,*, Wang Yulin1,2,*, Xu Qijun1,2,*, Yuan Hongjun 1,2,*, Wei Zexiu2,3,*, Ni Mazhaxi1,2   

  1. 1. Tibet Academy of Agriculture and Animal Husbandry Sciences,Lhasa 850002;
    2. Barley Improvement and Yak Breeding Key Laboratory of Tibet Autonomous Region,Lhasa 850002;
    3. Research Insititute of Agriculture Resource and Environment,Tibet Academy of Agriculture and Animal Husbandry Sciences,Lhasa 850002
  • Received:2014-07-21 Published:2015-02-05 Online:2015-02-06

摘要: 干旱胁迫是制约农作物生产的重要限制因素之一,研究并增强作物的抗旱性具有重要意义。SnRK2(Sucrose non-fermenting 1-related protein kinase 2)基因编码一类蔗糖非酵解型蛋白激酶,该酶在ABA信号转录途径和抗渗透胁迫中起着重要作用。以青稞(Hordeum vulgare subsp. vulgare)抗旱品种喜马拉雅10号为材料,利用RT-PCR技术克隆获得了SnRK2基因全长cDNA序列,命名为HbSnRK2.4(登录号:KJ699389)。生物信息学分析表明,该基因全长1 310 bp,编码362个氨基酸序列,蛋白分子量为41.94 kD,等电点(pI)为5.96。Prosite Scan分析结果表明,HbSnRK2.4含有多个干旱胁迫响应蛋白的作用位点,如酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、酪氨酸激酶磷酸化位点、蛋白激酶C磷酸化位点及N-豆蔻酰化位点等。利用实时定量PCR方法研究了HbSnRK2.4在干旱胁迫条件下及复水后不同时间点的表达情况,发现HbSnRK2.4在土壤绝对含水量为33.4%时表达量最高,随着土壤绝对含水量的下降而下调表达;当达到作物正常生长所需的土壤绝对含水量时又开始上调表达;进行干旱胁迫后(<15.5%)基因表达量下降;复水后8 h时恢复正常表达水平。

关键词: 青稞, HbSnRK2.4, 基因克隆, 干旱胁迫, 表达模式

Key words: Tibetan hulless barley, HbSnRK2.4, drought stress, gene cloning, expression pattern