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盐酸普鲁卡因对人结肠癌HT-29细胞Syk基因甲基化及表达的影响

高曰文;朱耀明;王艳林;朱晨宇;秦烨;胡汉卿;韩钰;   

  1. 三峡大学医学院;三峡大学第一临床医学院;三峡大学分子生物所;
  • 出版日期:2010-12-26 发布日期:2010-12-26
  • 基金资助:
    三峡大学研究生科研创新基金项目(2009-35)

  • Published:2010-12-26 Online:2010-12-26

摘要: 旨在探讨盐酸普鲁卡因(procaine,PCA)对人结肠癌HT-29细胞Syk基因甲基化及表达的影响。应用巢式双重甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-specific PCR,MSP)检测盐酸普鲁卡因处理前后HT-29细胞中Syk基因启动子的甲基化水平。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹技术观察HT-29细胞内Syk基因表达情况。MSP检测发现人结肠癌HT-29细胞中Syk基因存在甲基化,经盐酸普鲁卡因处理能够使Syk基因甲基化水平下降。RT-PCR和蛋白印迹分析结果显示,人结肠癌HT-29细胞经盐酸普鲁卡因处理后Syk基因表达上调。人结肠癌HT-29细胞中Syk基因启动子甲基化导致基因表达沉默,盐酸普鲁卡因能逆转Syk基因启动子区域CpG岛甲基化,使Syk基因活化并表达上调,提示盐酸普鲁卡因具有治疗结肠癌的潜在应用价值。

关键词: 盐酸普鲁卡因, Syk基因, 甲基化