重组人抗血栓蛋白在大肠杆菌中的自诱导表达及纯化

重组人抗血栓蛋白在大肠杆菌中的自诱导表达及纯化

龚志飞;杨翔;颜法宝;陈强;孙小强;华子春;

常州大学石油化工学院;常州靶标生物医药研究所有限公司;南京大学常州高新技术研究院;

出版日期:2011-12-26 发布日期:2011-12-26
基金资助:
江苏省自然科学基金(BK2010046,BK2008138,BE2008639,BY2009147);;

Published:2011-12-26 Online:2011-12-26

摘要/Abstract

摘要： 旨在优化重组人抗血栓蛋白(rHAP)工程菌的自诱导培养基,以提高菌体产量及可溶性的重组rHAP蛋白含量。选取蛋白胨、酵母提取物、甘油、葡萄糖为因素,各取4个水平,采用正交表L16(45)进行试验设计,对影响菌体生长和可溶性rHAP表达水平的乳糖浓度进行了优化。结果表明自诱导培养基碳氮源的最优配比:2%蛋白胨,1.5%酵母,0.5%甘油,0.03%葡萄糖,0.2%乳糖。此时表达菌密度OD600和可溶性rHAP目标蛋白表达量分别是未优化前的2.04倍和2.85倍。在20 L发酵表达时,rHAP工程菌OD600值高达93,菌体湿量为1 620 g/20 L。利用Q-Sepharose和SP-Sepharose纯化,Western blotting结果表明表达蛋白为目的融合蛋白。

关键词: 抗血栓蛋白, 优化培养, 发酵, 纯化, 鉴定

龚志飞;杨翔;颜法宝;陈强;孙小强;华子春;. 重组人抗血栓蛋白在大肠杆菌中的自诱导表达及纯化[J]. .

[1]	周璐祺, 崔婷茹, 郝楠, 赵雨薇, 赵斌, 刘颖超. 化学蛋白质组学在天然产物分子靶标鉴定中的应用[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 12-26.
[2]	吴巧茵, 施友志, 李林林, 彭政, 谭再钰, 刘利平, 张娟, 潘勇. 类胡萝卜素降解菌株的原位筛选及其在雪茄提质增香中的应用[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 192-201.
[3]	江海溶, 崔若琪, 王玥, 白淼, 张明露, 任连海. NH₃和H₂S降解功能菌的分离鉴定及降解特性研究[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 246-254.
[4]	苗永美, 苗翠苹, 于庆才. 枯草芽孢杆菌BBs-27发酵液性质及脂肽对黄色镰刀菌的抑菌作用[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 255-267.
[5]	徐发迪, 徐康, 孙东明, 李萌蕾, 赵建志, 鲍晓明. 基于杨木（Populus sp.）的二代燃料乙醇技术研究进展[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 27-39.
[6]	张岳一, 兰社益, 裴海闰, 封棣. 多菌种联用发酵燕麦麸皮工艺优化及发用功效评价[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 58-70.
[7]	程亚楠, 张文聪, 周圆, 孙雪, 李玉, 李庆刚. 乳酸乳球菌生产2'-岩藻糖基乳糖的途径构建及发酵培养基优化[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 84-96.
[8]	赵思佳, 王晓璐, 孙纪录, 田健, 张杰. 代谢工程改造毕赤酵母生产赤藓糖醇[J]. 生物技术通报, 2023, 39(8): 137-147.
[9]	饶紫环, 谢志雄. 一株Olivibacter jilunii 纤维素降解菌株的分离鉴定与降解能力分析[J]. 生物技术通报, 2023, 39(8): 283-290.
[10]	马俊秀, 吴皓琼, 姜威, 闫更轩, 胡基华, 张淑梅. 蔬菜软腐病菌广谱拮抗细菌菌株筛选鉴定及防效研究[J]. 生物技术通报, 2023, 39(7): 228-240.
[11]	谢东, 汪流伟, 李宁健, 李泽霖, 徐子航, 张庆华. 一株多功能菌株的发掘、鉴定及解磷条件优化[J]. 生物技术通报, 2023, 39(7): 241-253.
[12]	游子娟, 陈汉林, 邓辅财. 鱼皮生物活性肽的提取及功能活性研究进展[J]. 生物技术通报, 2023, 39(7): 91-104.
[13]	张路阳, 韩文龙, 徐晓雯, 姚健, 李芳芳, 田效园, 张智强. 烟草TCP基因家族的鉴定及表达分析[J]. 生物技术通报, 2023, 39(6): 248-258.
[14]	王一帆, 候林慧, 常永春, 杨亚杰, 陈天, 赵祝跃, 荣二花, 吴玉香. 陆地棉与拟似棉异源六倍体的合成与性状鉴定[J]. 生物技术通报, 2023, 39(5): 168-176.
[15]	车永梅, 郭艳苹, 刘广超, 叶青, 李雅华, 赵方贵, 刘新. 菌株C8和B4的分离鉴定及其耐盐促生效果和机制[J]. 生物技术通报, 2023, 39(5): 276-285.

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