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兔转基因单细胞克隆株的分离培养及其染色体倍性分析

侯健;安晓荣;关宏;苟克勉;林爱星;陈永福   

  1. 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,中国农业大学农业生物技术国家重点实验室 北京100094
  • 出版日期:2002-10-26 发布日期:2002-10-26

  • Published:2002-10-26 Online:2002-10-26

摘要: 为检测原代二倍体细胞转基因后单细胞克隆的增殖能力及其染色体倍性稳定性 ,用脂质体介导的转染方法将质粒DNApEGFP -C1(带有报告基因GFP和Neor)导入体外培养的兔胎儿成纤维细胞中 ,经G4 18药物筛选后 ,分离出 73个GFP阳性细胞克隆 ,最后存活 13个 (18% ) ,对其中 9个克隆的染色体倍性进行分析 ,结果只有 2个 (2 2 % )克隆的染色体倍性正常率在 75 %以上 ,分别为 80 %和 75 % ,其余 7个克隆的染色体倍性正常率均在 70 %以下。这表明 ,当使用转基因单细胞克隆株作为供核细胞生产克隆动物时 ,单细胞克隆的增殖代数和染色体倍性的稳定性需要进一步研究提高。

关键词: 单细胞克隆, 转基因, 核型分析, 胎儿成纤维细胞系