生物技术通报

叶能胜;罗国安;王义明;

2006, 0(03): 1-4.

摘要 ( 99 )

PDF (165KB) ( 428 )

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蛋白质组学技术通过整合多项技术来分析生物体的全部蛋白质成分,通过考察不同状态下细胞或组织蛋白质组的变化情况来了解细胞活动的分子机理。干细胞分化过程中受外界条件的影响其蛋白表达模式也表现出一定的差异,对干细胞分化过程中进行蛋白质组学研究将有利于从蛋白质分子水平上阐明干细胞的分化机理。本文对蛋白质组学及其在干细胞研究中的应用加以评述。

双向凝胶电泳的实验操作及进展

叶妙水;钟克亚;胡新文;郭建春;

2006, 0(03): 5-10.

摘要 ( 86 )

PDF (167KB) ( 435 )

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双向聚丙烯酰胺凝胶电泳是研究蛋白质组的核心技术,本文重点介绍了双向凝胶电泳的原理、实验操作过程中的具体步骤以及近年来在实验过程中发展的一些新方法和进展。

磁性纳米生物材料在医学上的应用

肖旭贤;何琼琼;黄可龙;

2006, 0(03): 11-13.

摘要 ( 99 )

PDF (115KB) ( 1436 )

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磁性纳米生物材料因其独特的性能而具有广泛的应用价值,尤其在肿瘤治疗,细胞及生物分子的分离纯化,临床诊断和组织工程领域,给人类疾病的治疗带来了新的契机和希望。本文介绍和评估了国内外纳米磁粒在医学应用上的进展,并展望了其未来。

植物抗病毒基因工程研究进展

马丽;周玉亮;张春庆;

2006, 0(03): 14-20.

摘要 ( 93 )

PDF (206KB) ( 795 )

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为了得到抗病毒的寄主植物,很多学者进行了大量研究,形成了许多行之有效的抗病毒育种策略。利用来源于病毒自身基因的一些抗病毒策略(Pathogen-derived resistance,PDR),如病毒外壳蛋白基因,复制酶基因,反义RNA、移动蛋白基因等,均可以获得一些抗病毒植物。近年来,对RNA介导的抗病毒策略机制进行了深入研究。基因沉默的发现使得人们对植物和病毒的相互关系有了一个新的认识。转录后基因沉默(Post-transcriptional gene silencing,PT-GS)现象是植物抵御病毒入侵,保持自身基因组完整性的一种防御机制。对于PTGS产生的机理,已经提出不少模型,但是都未能较全面地解释基因沉默中出现的各种实验现象。对转录后基因沉默的特点、发生机理和作为抗病毒防卫机制,在改良植物抗病性方面的应用和进展进行了综述。

小麦HMW-GS基因及其AS-PCR分子标记研究进展

孙宪印;吴科;钱兆国;米勇;李斯深;

2006, 0(03): 21-24.

摘要 ( 109 )

PDF (119KB) ( 495 )

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小麦高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)与小麦品质性状,尤其是沉降值性状显着相关。利用其做分子标记选育聚合优质亚基的品种,具有快速、简单、实用、有效的特点。目前,普通小麦基因组中已有15个已命名Glu-1基因被克隆和测序,这使设计引物序列、进行等位基因的特异性扩增成为可能。对普通小麦高分子量谷蛋白亚基基因组成特点及分子标记现状进行了分析,并针对国内利用高分子量谷蛋白亚基进行分子标记辅助育种做了展望。

拟南芥液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白研究进展

李志亮;黄丛林;王刚;吴忠义;

2006, 0(03): 25-27.

摘要 ( 77 )

PDF (122KB) ( 453 )

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盐分是植物生长发育的主要限制因素之一,而离子在胞内区室之间的选择性运动对提高植物耐盐性是至关重要的。来自于拟南芥(Arabidopsis thaliana)的AtNHX1基因可编码Na+/H+逆向转运蛋白,而Na+/H+逆向转运蛋白AtNHX1可将细胞质中多余的Na+排进液泡来消除Na+的毒害,维持细胞的渗透平衡,提高植物的耐盐性。简要综述了AtNHX1基因及Na+/H+逆向转运蛋白AtNHX1的特征,AtNHX1的耐盐机制以及植物耐盐基因工程改良等方面的研究进展。

植物SAR和ISR中的乙烯信号转导网络

赵利辉;邱德文;刘峥;

2006, 0(03): 28-32.

摘要 ( 161 )

PDF (152KB) ( 1102 )

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乙烯作为重要的信号分子在植物SAR和ISR中发挥重要作用。受病原物和其它激发子处理后,植物体内乙烯被合成,为内质网上一个His激酶类受体家族(Ⅰ型和Ⅱ型)所感知,在铜离子的转运活性下,乙烯与受体的结合使Raf-类Ser/Thr激酶CTR1失活。在CTR1的下游,EIN2、EIN3、EIN5/AIN1、EIN6、EIN7是乙烯反应的正调节子,负责乙烯信号的传导。EIN2编码功能未知的新的膜整合蛋白,而EIN5/AIN1、EIN6和EIN7尚未从分子水平上进行鉴定。定位在核内的DNA结合蛋白EIN3,直接作用于ERF1,调节乙烯反应基因的转录,激活植物防御素和病程相关蛋白基因的表达,使植物建立抗病性反应。

植物内生菌的开发与研究进展

李强;刘军;周东坡;朱婧;

2006, 0(03): 33-37.

摘要 ( 263 )

PDF (141KB) ( 1355 )

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植物的内生菌是巨大的资源宝库,具有重大的研究和开发价值。对近年来植物内生菌的开发与研究进展进行了综述,包括内生菌的起源、分布特点、分离方法,内生菌在医药、生物防治、对污染物的降解等开发与应用方面的研究进展。

荧光素及其合成的研究进展

黄乐天;蒋琳兰;

2006, 0(03): 38-41.

摘要 ( 219 )

PDF (124KB) ( 670 )

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在生物发光体内,荧光素作为直接释放光子的物质和能量的传递物质在荧光素酶发光体系中发挥着不可或缺的作用。现在已知的荧光素种类繁多,不同来源的荧光素在结构、性质与合成上大不相同,荧光素在生物体内的生成问题是目前研究的焦点。为了更清楚的认识荧光素在体内的生物合成与起源问题,本文对几种主要荧光素的结构性质和有关其生物合成研究的最新报道进行综述。

一种新的基因敲除术-RNAi

李颖平;张映;邵国青;

2006, 0(03): 42-45.

摘要 ( 107 )

PDF (116KB) ( 1026 )

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RNAi作为关闭特定的基因新技术,为基因功能研究提供了一个快速、简便的方法,RNAi主要通过dsR-NA被核酸切割成21￣25nt的干扰小RNA即siRNA,由siRNA介导的识别并切割同源性靶mRNA分子而实现。RNAi是新发现的一种通过dsRNA特异性高效抑制基因表达途径。在随后的短短几年中,RNAi现象被发现存在于大多数真核生物中,这种存在揭示了RNAi可能是出现于生命进化的早期阶段[1]。

RNA干扰在动物研究中的应用

苏光华;张元跃;

2006, 0(03): 46-48.

摘要 ( 98 )

PDF (87KB) ( 401 )

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RNA干扰(RNAi)是指具有同源性的双链RNA分子导入细胞后,使促进与之同源的mRNA发生特异性降解的现象。随着对RNAi分子机制研究深入,它将成为研究动物基因功能、蛋白质功能、基因治疗、基因药物的强有力的工具。

植物性转基因食品的检测与验证方法

秦春圃;

2006, 0(03): 48-48.

摘要 ( 97 )

PDF (33KB) ( 446 )

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生物大分子分离技术:过去、现状和未来

李洁;何德;

2006, 0(03): 49-53.

摘要 ( 258 )

PDF (142KB) ( 1266 )

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生物大分子包括多肽、酶、蛋白质、核酸(DNA和RNA)以及多糖等。生物大分子分离技术是生命科学研究中的关键技术之一。当前,各学科之间的交叉渗透为生物大分子分离技术的发展提供了更多的契机。对以沉淀、透析、超滤和溶剂萃取为代表的传统分离技术,以及色谱,电泳等现代分离技术的发展概况、原理、特点及应用进行了综述。并结合生命科学的发展现状,展望了生物大分子分离技术的发展前景。

肿瘤干细胞的研究进展

秦春圃;

2006, 0(03): 53-53.

摘要 ( 84 )

PDF (33KB) ( 360 )

相关文章 | 计量指标

利用高保真酶扩增特性调整基因读码框的方法

张国广;陈亮;吴亦亮;曾雅明;

2006, 0(03): 54-57.

摘要 ( 83 )

PDF (198KB) ( 970 )

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在基因工程研究中,经常要涉及到对目的基因读码框进行调整的研究。本文报道了利用高保真DNA聚合酶扩增DNA后产生平末端的特性,及限制性内切酶对一重组的原核表达载体pET28a-HA进行读码框调整的研究,测序结果显示读码框按照预期设计正确调整,表明高保真DNA聚合酶可以用于DNA 3'凹陷端的补平,在DNA 3'凹陷端平滑化时多了一个有效的选择。

中国地方猪ESR基因PvuⅡ多态性及其与产仔数的关系

秦春圃;

2006, 0(03): 57-72.

摘要 ( 85 )

PDF (62KB) ( 375 )

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毕赤酵母Mut~+和Mut~s重组子表达植酸酶基因及其表达物的酶学性质比较

李健;彭远义;

2006, 0(03): 58-62.

摘要 ( 132 )

PDF (187KB) ( 469 )

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将本实验室已成功构建的植酸酶基因表达载体pPIC9K-phyA酶切线性化后,通过原生质体法整合到巴氏毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115菌株细胞中,利用测定酶活、观察转化子在MM和MD平板上的生长情况以及PCR菌落鉴定,筛选出表型为甲醇利用缓慢型的重组子(His+Muts)。在相同培养条件下比较甲醇利用缓慢型的重组子和Mut+重组子在表达植酸酶方面的异同。实验结果表明,诱导表达48h后,Mut+和MutS重组子表达的产物在SDS-PAGE胶上都出现了清晰的目的带。酶学性质测定表明,酶学性质无显着差异。

大型绿藻浒苔转化表达系统选择标记的筛选

叶静;张喆;李富超;秦松;何培民;

2006, 0(03): 63-67.

摘要 ( 106 )

PDF (199KB) ( 383 )

相关文章 | 计量指标

主要研究了条浒苔对抗生素氯霉素和除草剂Basta的敏感性,以确定适合的阳性选择标记基因。应用不同浓度氯霉素(0、25、50、75、100、125μg/ml)和Basta(0、5、12.5、25、37.5、50μg/ml)对不同发育时期条浒苔细胞存活率影响进行了测定。实验结果表明:不同发育时期条浒苔对氯霉素和Basta的敏感性不同。其中最大浓度125μg/ml浓度的氯霉素在15d内对条浒苔孢子和小苗两个不同发育时期的细胞均难以达到全部杀死效果,相对存活率仍分别为1%和20%;而Basta对条浒苔孢子和小苗均具有很强的杀生作用,其中5μg/ml浓度的Basta在3d内可将条浒苔孢子全部杀死,12.5μg/ml浓度下约一周时间可以将浒苔小苗全部致死。本实验结果提示bar基因有可能成为浒苔基因工程较理想的选择标记基因。

球衣菌胞内聚β-羟基丁酸提取方法的研究

许旭萍;陈接锋;

2006, 0(03): 68-72.

摘要 ( 107 )

PDF (162KB) ( 806 )

相关文章 | 计量指标

以球衣菌(Sphaerotilus natans FQ40)为材料,比较多种破壁方法对其胞内PHB提取率的影响。结果表明SDS-NaClO混合破壁法最适宜于提取球衣菌胞内PHB。细胞悬液先用10g/L SDS,35℃处理10min,再用体积分数5%的NaClO处理5min后,经离心、洗涤、烘干,用热氯仿抽提PHB,提取率可达56%,纯度与标准品相同。

二元融合子与荧光假单胞菌耐药性遗传标记的筛选

陈光荣;肖克宇;

2006, 0(03): 73-76.

摘要 ( 85 )

PDF (140KB) ( 386 )

相关文章 | 计量指标

应用定性和定量药物敏感性试验与诱变相结合,筛选出荧光假单胞菌56-12-10菌株的遗传标记为链霉素抗性,二元融合子AM-1菌株的遗传标记为环丙沙星抗性,确定了在这两种细菌原生质体融合试验中,选择培养基中链霉素的应用浓度为300Iu/ml,环丙沙星应用浓度为100Iu/ml。

中国传统酸肉中葡萄球菌的分离鉴定与应用研究

李宗军;

2006, 0(03): 77-80.

摘要 ( 117 )

PDF (149KB) ( 731 )

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对我国传统酸肉中的葡萄球菌进行了首次研究,结果表明:葡萄球菌是中国传统酸肉中的重要微生物类群之一,在140个MSA培养物中有101株葡萄球菌,微球菌27株,其它杆菌和H2O2-球菌12株,所有葡萄球菌中有64%对新生霉素有抗性,属腐生葡萄球菌群及相关种群。生物培养法测定到腐生型葡萄球菌、木糖葡萄球菌和肉葡萄球菌对肌原纤维蛋白有不同程度的水解能力,可以开发成肉类专用发酵剂。

新疆盐生植物耐盐基因NHX转化甘蓝型油菜及其耐盐性的初步研究

郝东风;兰海燕;陈邦党;张富春;

2006, 0(03): 81-84.

摘要 ( 79 )

PDF (139KB) ( 464 )

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以甘蓝型油菜带柄子叶为转化受体,通过根癌农杆菌EHA105(Agrobacterium tumefaciens)介导将盐角草(Salicornia)的Na+/H+反向运输体基因NHX导入新疆主栽油菜1khp11品系,获得了抗卡那霉素的再生植株,并对影响遗传转化的一些关键因素进行了研究。实验结果表明:带柄子叶在含有2,4-D的培养基上经过2d短时间的预培养后在菌液浓度OD600为0.3时在28℃摇床浸染15min时卡那抗性绿苗率可达10%￣12%;经过抗性植株的PCR及RT-PCR检测证明外源基因已整合到油菜基因组中,并通过表型实验证实由于外源基因的导入提高了植株的耐盐能力。

降落PCR法快速检测高羊茅转基因植株

田路明;黄丛林;张秀海;张潞生;吴忠义;

2006, 0(03): 85-87.

摘要 ( 67 )

PDF (120KB) ( 417 )

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通过CTAB微量提取高羊茅(Festuca arundinacea)转基因再生植株基因组DNA。用9600型PCR仪器设计降落PCR反应程序,对高羊茅转基因植株两个片段OSISAP1(495bp)和GFP-nos(1 000bp)进行扩增;同时进行了PCR扩增的初步检测。结果表明降落PCR法能快速准确检测转基因植株;而且更适合多个基因片段同时检测,从而提高PCR分子检测的效率,以提高转基因植株鉴定效率。

小叶杨Δ~1-吡咯琳-5-羧酸合成酶(P5CS)基因克隆及在杂种落叶松中的转化

韩素英;张守攻;汪泉;周春娥;刘国华;齐力旺;

2006, 0(03): 88-92.

摘要 ( 89 )

PDF (235KB) ( 479 )

相关文章 | 计量指标

以小叶杨为材料构建了干旱胁迫和正常生长条件下的cDNA文库,以特异性引物从中扩增出一条1 850bp大小的DNA片段,经序列分析证实该片段编码Δ1-吡咯琳-5-羧酸合成酶(P5CS)。将该片段构建入植物表达载体pBI121中,在落叶松杂交育种中利用花粉管通道法将带有该P5CS基因的植物表达质粒转化入杂种落叶松,收获球果取出种子,提取转化种子发芽长出幼芽的DNA,特异性PCR扩增和Southern,Western Blotting检测证实落叶松中已导入P5CS基因。

猪电压依赖性阴离子通道1基因的分离及物理定位

叶香尘;兰干球;蒋和生;郭亚芬;王爱德;

2006, 0(03): 93-94.

摘要 ( 86 )

PDF (60KB) ( 452 )

相关文章 | 计量指标

从猪胚胎骨骼肌cDNA文库中筛选出一克隆子,通过测序及电子延伸获得包含全长CDS的猪VDAC1基因cDNA序列。比对发现此基因在核苷酸和氨基酸水平与人及小鼠都具有较高的同源性。应用辐射杂种板(RH)对此基因进行染色体的精确定位,定位结果显示VDAC1基因定位在猪2号染色体长臂。

海绵宏基因组文库构建及抗菌肽功能基因的初步筛选

吴杰;李志勇;张戌升;

2006, 0(03): 95-98.

摘要 ( 109 )

PDF (226KB) ( 683 )

相关文章 | 计量指标

宏基因组文库技术是利用未培养微生物基因资源的有效途径。成功构建澳大利亚厚皮海绵的Fosmid宏基因组文库,插入片段平均大小为36.8kb。利用建立的宏基因组文库,采用PCR技术初步筛选到具有编码抗菌肽的功能基因。这是我国首次尝试构建海绵宏基因组文库,对于今后开发利用海绵丰富的基因资源具有重要的意义。

一种改进的快速PCR定点突变技术

高川;韩维涛;宋云扬;张靖;王惠芳;

2006, 0(03): 99-103.

摘要 ( 111 )

PDF (238KB) ( 1632 )

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在基因工程与蛋白质工程研究中常常用到基因突变技术制备突变体,用于研究基因调控、蛋白质的结构与功能。本项研究在快速PCR定点突变技术的基础上,改进实验方法,简化实验步骤,以适用蛋白质结构改造研究的需要。建立的突变技术仅需一次PCR反应即可完成基因的定点突变,突变效率为79.6%左右。该法对1～3个连续碱基的突变和对间隔4个甚至多达15个碱基的数个密码子突变效果都很好。

几种具有重要的药物学用途的海洋微生物酶抑制剂

汪开治;

2006, 0(03): 104-106.

摘要 ( 94 )

PDF (92KB) ( 454 )

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