]*>","")" /> 毕赤酵母Mut~+和Mut~s重组子表达植酸酶基因及其表达物的酶学性质比较

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毕赤酵母Mut~+和Mut~s重组子表达植酸酶基因及其表达物的酶学性质比较

李健;彭远义;   

  1. 西南大学动物科学技术学院,西南大学动物科学技术学院 重庆400716,重庆400716
  • 出版日期:2006-06-26 发布日期:2006-06-26

  • Published:2006-06-26 Online:2006-06-26

摘要: 将本实验室已成功构建的植酸酶基因表达载体pPIC9K-phyA酶切线性化后,通过原生质体法整合到巴氏毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115菌株细胞中,利用测定酶活、观察转化子在MM和MD平板上的生长情况以及PCR菌落鉴定,筛选出表型为甲醇利用缓慢型的重组子(His+Muts)。在相同培养条件下比较甲醇利用缓慢型的重组子和Mut+重组子在表达植酸酶方面的异同。实验结果表明,诱导表达48h后,Mut+和MutS重组子表达的产物在SDS-PAGE胶上都出现了清晰的目的带。酶学性质测定表明,酶学性质无显着差异。

关键词: 植酸酶, MutS重组子, Mut~+重组子, 酶学性质