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芽孢杆菌β-甘露聚糖酶基因的克隆及表达

马鑫;赵仲麟;李亮;陈明;林敏;平淑珍;   

  1. 中国农业科学院生物技术研究所;中国农业大学生物学院;
  • 出版日期:2009-02-26 发布日期:2009-02-26
  • 基金资助:
    国家863计划重大专项“新型植酸酶分子设计技术”(2006AA020202);; 国家863计划重点项目“特殊环境微生物资源的开发利用技术”(2007AA021304)

  • Published:2009-02-26 Online:2009-02-26

摘要: 从新疆极端干燥环境土壤样品中筛选到具有高β-甘露聚糖酶活性的芽孢杆菌(Bacillussp.MX)。运用PCR技术从该菌基因组中克隆得到β-甘露聚糖酶基因,连接到表达载体pET-28a上,在大肠杆菌BL21中高效表达的基因产物经亲和层析纯化,SDS-PAGE凝胶电泳分析显示该蛋白的相对分子质量为41kD。酶学性质分析表明该酶在25~95℃,pH3.0~9.6范围内均具有酶活。最适作用温度55℃和pH值5.0,酶比活力为4572U/mg。在最适pH5.0,高温85℃和95℃分别处理10min后,该酶相对酶活力仍保持51%和34%,显示β-甘露聚糖酶具有较好的耐酸性和热稳定性。

关键词: 芽孢杆菌, β-甘露聚糖酶, 表达, 酶活