华根霉前导肽和成熟肽脂肪酶基因的克隆表达及性质研究

华根霉前导肽和成熟肽脂肪酶基因的克隆表达及性质研究

李飏;王栋;徐岩;

江南大学生物工程学院教育部工业生物技术重点实验室;

出版日期:2009-02-26 发布日期:2009-02-26
基金资助:
国家自然科学基金(30470046);; 江苏省自然科学基金(BK2007020);; 江苏省高技术研究计划项目(BG2006011)资助

Published:2009-02-26 Online:2009-02-26

摘要/Abstract

摘要： 以华根霉(Rhizopus chinensis CCTCCM201021)为出发菌株,提取总DNA,PCR扩增出前导肽脂肪酶基因(proRCL)及成熟肽脂肪酶基因(mRCL),克隆到原核载体pET-28a,转化E.coli BL21(DE3),诱导表达并纯化出活性目的蛋白。经SDS-PAGE分析,重组蛋白ProRCL和MRCL的分子量分别约43kD和33kD。两重组脂肪酶主要酶学性质基本相似,最适反应温度均为35℃,40℃下较为稳定;最适反应pH相近,分别为8.0和8.5;以pNP脂肪酸酯为底物,均对短链脂肪酸酯底物特异性较高。MRCL上述性质与野生型RCL基本一致。研究结果表明,通过条件控制可以利用E.coli表达系统表达具有活性的华根霉前导肽脂肪酶ProRCL和成熟肽脂肪酶MRCL。与米根霉脂肪酶(ROL)不同,前导序列对华根霉脂肪酶的主要酶学特性没有显着影响。

关键词: 华根霉, 前导肽脂肪酶, 成熟肽脂肪酶, 克隆, 表达, 性质

李飏;王栋;徐岩;. 华根霉前导肽和成熟肽脂肪酶基因的克隆表达及性质研究[J]. .

[1]	林红妍, 郭晓蕊, 刘迪, 李慧, 陆海. 转录组分析转录因子AtbHLH68调控细胞壁发育的分子机制[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 105-116.
[2]	娄慧, 朱金成, 杨洋, 张薇. 抗、感品种棉花根系分泌物对尖孢镰刀菌生长及基因表达的影响[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 156-167.
[3]	杨志晓, 侯骞, 刘国权, 卢志刚, 曹毅, 芶剑渝, 王轶, 林英超. 不同抗性烟草品系Rubisco及其活化酶对赤星病胁迫的响应[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 202-212.
[4]	苗永美, 苗翠苹, 于庆才. 枯草芽孢杆菌BBs-27发酵液性质及脂肽对黄色镰刀菌的抑菌作用[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 255-267.
[5]	陈中元, 王玉红, 代为俊, 张艳敏, 叶倩, 刘旭平, 谭文松, 赵亮. 柠檬酸铁铵对悬浮HEK293细胞转染的影响机制探究[J]. 生物技术通报, 2023, 39(9): 311-318.
[6]	吕秋谕, 孙培媛, 冉彬, 王佳蕊, 陈庆富, 李洪有. 苦荞转录因子基因FtbHLH3的克隆、亚细胞定位及表达分析[J]. 生物技术通报, 2023, 39(8): 194-203.
[7]	王佳蕊, 孙培媛, 柯瑾, 冉彬, 李洪有. 苦荞糖基转移酶基因FtUGT143的克隆及表达分析[J]. 生物技术通报, 2023, 39(8): 204-212.
[8]	李博, 刘合霞, 陈宇玲, 周兴文, 朱宇林. 金花茶CnbHLH79转录因子的克隆、亚细胞定位及表达分析[J]. 生物技术通报, 2023, 39(8): 241-250.
[9]	付钰, 贾瑞瑞, 何荷, 王良桂, 杨秀莲. 两种砧木楸树嫁接苗生长差异及转录组比较分析[J]. 生物技术通报, 2023, 39(8): 251-261.
[10]	张曼, 张叶卓, 何其邹洪, 鄂一岚, 李晔. 植物细胞壁结构及成像技术研究进展[J]. 生物技术通报, 2023, 39(7): 113-122.
[11]	王帅, 冯宇梅, 白苗, 杜维俊, 岳爱琴. 大豆GmHMGR基因响应外源激素及非生物胁迫功能研究[J]. 生物技术通报, 2023, 39(7): 131-142.
[12]	孙明慧, 吴琼, 刘丹丹, 焦小雨, 王文杰. 茶树CsTMFs的克隆与表达分析[J]. 生物技术通报, 2023, 39(7): 151-159.
[13]	谢田朋, 张佳宁, 董永骏, 张建, 景明. 早期抽薹对当归根际土壤微环境的影响[J]. 生物技术通报, 2023, 39(7): 206-218.
[14]	梅欢, 李玥, 刘可蒙, 刘吉华. 小檗碱桥酶高效原核表达及生物合成l-SLR的研究[J]. 生物技术通报, 2023, 39(7): 277-287.
[15]	赵雪婷, 高利燕, 王俊刚, 沈庆庆, 张树珍, 李富生. 甘蔗AP2/ERF转录因子基因ShERF3的克隆、表达及其编码蛋白的定位[J]. 生物技术通报, 2023, 39(6): 208-216.

华根霉前导肽和成熟肽脂肪酶基因的克隆表达及性质研究

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价