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黑曲霉脂肪酶盖子结构域突变对其活性的影响

薛龙吟;林瑞凤;舒正玉;黄建忠;   

  1. 福建师范大学生命科学学院;福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心福建省现代发酵技术工程研究中心;
  • 出版日期:2010-02-26 发布日期:2010-02-26
  • 基金资助:
    国家“863”计划资助项目(2007AA100703);; 国家自然科学基金资助项目(30870545);; 福建省自然科学基金(杰青)项目(2009J06013);; 福建省科技平台资助项目(2005Q007)

  • Published:2010-02-26 Online:2010-02-26

摘要: 比较黑曲霉脂肪酶与黑曲霉酯酶的3-D结构发现二者在盖子结构域存在显着差异。根据已解析的酯酶的3-D结构信息,运用重叠延伸PCR技术,对黑曲霉脂肪酶的4个位点进行突变,以期获得开盖型黑曲霉脂肪酶。4个突变位点分别为形成黑曲霉脂肪酶盖子结构的α-螺旋与酯酶对应区域的α-螺旋相互置换;Ser84突变为Gly;Asp99突变为Pro;Lys108突变为Glu。4个重组质粒导入毕赤酵母GS115菌株进行异源表达后,仅pPCI9K-anl-D99P和pPCI9K-anl-K108E实现了活性表达。

关键词: 黑曲霉, 脂肪酶, 盖子结构域, 突变, 活性