利用TAIL-PCR克隆耐盐基因及其分析

利用TAIL-PCR克隆耐盐基因及其分析

张伟涛;程国军;周俊初;

中南林业科技大学生物环境科学与技术研究所;华中农业大学农业微生物国家重点实验室;

出版日期:2010-11-26 发布日期:2010-11-26
基金资助:
国家“973”项目(001CB1089);; 国家微生物资源平台建设项目(2005DKA21208-6)

Published:2010-11-26 Online:2010-11-26

摘要/Abstract

摘要： 通过大量筛选得到一株高耐盐的豇豆根瘤菌WME7,最高可耐15g/L NaCl,利用Tn5-sacB转座子对该菌株进行随机插入突变,从突变子中筛选获得30个共生缺陷型突变株。利用TAIL-PCR(thermal asymmetric interlaced PCR)方法克隆了突变株Tn5-sacB侧翼序列,通过BLAST发现有1个突变株的插入失活基因与鼠伤寒沙门氏菌抗银的结合蛋白SilE有94%同源性,表明有关Na+离子的抗性基因可能与Ag+离子的抗性基因有某种关系。该基因在其它菌中也能抗其它金属离子(铜、锌、钴、铬)。

关键词: 筛选, 耐盐根瘤菌, TAIL-PCR, 耐盐基因

张伟涛;程国军;周俊初;. 利用TAIL-PCR克隆耐盐基因及其分析[J]. .

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