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番茄脂氧合酶基因的表达和酶活性分析

胡廷章;肖国生;陈再刚;石汝杰;吴应梅;   

  1. 重庆三峡学院生物系;
  • 出版日期:2011-02-26 发布日期:2011-02-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(30771464);; 教育部“春晖计划”项目(Z2007-1-63006);; 重庆市教育委员会科学技术研究项目(KJ101111)

  • Published:2011-02-26 Online:2011-02-26

摘要: 将番茄脂氧合酶基因Tom loxD克隆至酵母表达载体pPIC9K中,转化毕赤酵母GS115菌株,构建组成型表达Tom loxD的酵母工程菌株。SDS-PAGE和W estern blot分析表明,经甲醇诱导,Tom loxD蛋白在酵母中得到表达,表达的融合蛋白分子量约为103.56 kD,与预测的分子量一致。酶活性分析表明,酵母中表达的Tom loxD蛋白具有脂氧合酶活性。半定量RT-PCR分析表明,Tom loxD基因在番茄中表达受机械损伤的诱导,损伤处理的番茄叶片中脂氧合酶的活性明显增高。说明Tom loxD基因在番茄防御信号中发挥作用。

关键词: 脂氧合酶, 番茄, 脂氧合酶活性, 毕赤酵母, TomloxD