α1,2-岩藻糖基转移酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

α1,2-岩藻糖基转移酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

贾红红;李玉;刘逸寒;王尧;梁晓梅;路福平;

天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部重点实验室;

出版日期:2011-03-26 发布日期:2011-03-26
基金资助:
国家自然科学基金青年科学基金项目(20806060);;天津市教委项目(20080601);; 天津科技大学引进人才科研启动基金项目(20080435)

Published:2011-03-26 Online:2011-03-26

摘要/Abstract

摘要： 利用PCR方法从幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,HP)基因组DNA中获得α1,2-岩藻糖基转移酶(α1,2-fuco-syltransferase,α1,2-fuct)基因,得到大小为906 bp的目的基因,将其定向插入到原核表达载体pET-22b(+)中,得到重组表达载体pET-fuct。将重组表达载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,25℃,0.1 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达4 h,并用SDS-PAGE分析目的蛋白的表达情况。结果表明,可表达出相对分子质量为33 kD的蛋白,与预期分子量一致,说明α1,2-岩藻糖基转移酶在大肠杆菌BL21中实现表达,应用HPLC法进行酶活检验,酶活达到了13.21 pmol/(mgPr.h)。

关键词: α12-岩藻糖基转移酶, 基因克隆, 原核表达, 大肠杆菌

贾红红;李玉;刘逸寒;王尧;梁晓梅;路福平;. α1,2-岩藻糖基转移酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[J]. .

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