]*>","")" /> 胡麻专化型尖孢镰刀菌ISSR-PCR最佳反应体系的建立

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胡麻专化型尖孢镰刀菌ISSR-PCR最佳反应体系的建立

苑琳;刘姗姗;路福平;李子钦;张辉;   

  1. 天津科技大学生物工程学院工业微生物重点实验室;内蒙古大学生命科学学院;内蒙古农牧业科学院;
  • 出版日期:2011-07-26 发布日期:2011-07-26
  • 基金资助:
    国家油用胡麻产业技术体系项目

  • Published:2011-07-26 Online:2011-07-26

摘要: 采用正交试验设计原理,对尖孢镰刀菌ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素进行优化筛选,确立了适合尖孢镰刀菌ISSR分析的反应体系,即25μL PCR反应体积中含有20 ng模板DNA、1 UTaq酶、0.4μmol/L引物、0.2 mmol/LdNTPs、4.0 mmol/L Mg2+和2.5μL10×buffer。PCR反应最佳退火温度根据引物而定,在此基础上筛选出12条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物。此研究为今后利用ISSR技术分析尖孢镰刀菌遗传多样性和群体结构奠定了基础。

关键词: 尖孢镰刀菌, ISSR, 正交设计, 反应体系, 优化, 引物筛选