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草鱼两个肌肉生长抑制素cDNA克隆、表达及过量表达对胚胎发育的影响

濮剑威;孙成飞;蒋霞云;邹曙明;   

  1. 上海海洋大学农业部种质资源与利用重点开放实验室;
  • 出版日期:2011-08-26 发布日期:2011-08-26
  • 基金资助:
    国家高技术研究发展计划“863”计划项目(2009AA10Z105);;公益性行业科研专项(200903045);; 上海市教委曙光计划项目(08SG50)

  • Published:2011-08-26 Online:2011-08-26

摘要: 肌肉生长抑制素(MSTN)是抑制肌肉生长和发育的重要生长调控因子。通过cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆草鱼MSTN-1型和MSTN-2型全长cDNA。RT-PCR分析结果表明,MSTN-1在草鱼肌肉、脑和眼中的转录量较高,在肝胰脏、脾脏和心的转录量较低,在肠、腮、性腺和肾中无表达;MSTN-2只在脑和肌肉中有表达。在草鱼胚胎发育的0-36 hpf期间,MSTN-1的转录量较低;在胚胎发育的36-48 hpf期间,其转录量呈逐渐升高的趋势;MSTN-2各时相均无表达,可能因为该基因在草鱼胚胎发育过程中不起重要作用。通过分别显微注射MSTN-1型和MSTN-2型mRNA至斑马鱼1-2细胞期胚胎。结果显示,注射MSTN-1型mRNA过表达可导致斑马鱼体节发生期胚胎的前-后轴拉长,背-腹轴变短,脊索轻微扭曲,以及体节发育受到强烈抑制而不分化等现象。注射MSTN-2型mRNA胚胎早期发育有所延迟并未发生明显变化,但发育至60 h之后尾部明显发生严重弯曲。

关键词: 草鱼, 肌肉生长抑制素, 克隆, 过表达