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美洲棉铃虫细胞中dsRNA介导的egfp基因沉默分析

赵淑玲;梁昌镛;李敏;王海花;张高瞻;   

  1. 扬州大学生物科学与技术学院;
  • 出版日期:2011-11-26 发布日期:2011-11-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(30970138)

  • Published:2011-11-26 Online:2011-11-26

摘要: 为了分析在美洲棉铃虫细胞(HzAM1)内RNAi的效果,将egfp基因克隆到含有双向T7启动子/终止子的质粒载体中,在体外合成全长的增强型绿色荧光蛋白(egfp)基因dsRNA,将dsRNA和含有能在昆虫细胞内表达eGFP的质粒一起转染HzAM1细胞,分析dsRNA对eGFP表达的抑制作用。结果显示,由egfp基因转录的长dsRNA能有效抑制HzAM1细胞内eGFP的表达,而且该抑制作用表现为剂量依赖效应。但是抑制作用并不彻底,在高剂量的dsRNA处理下,仍有部分细胞内能观察到eGFP的表达。

关键词: RNA干扰, 美洲棉铃虫细胞, 体外转录, 绿色荧光蛋白, 昆虫