缺刻缘绿藻脂肪酸延长酶基因在拟南芥中的表达分析

缺刻缘绿藻脂肪酸延长酶基因在拟南芥中的表达分析

于水燕;陈颢;周志刚;

上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室上海高校水产养殖E-研究院;国家海洋局第一海洋研究所;

出版日期:2011-11-26 发布日期:2011-11-26
基金资助:
国家自然科学基金资助项目(30972243);;

Published:2011-11-26 Online:2011-11-26

摘要/Abstract

摘要： 缺刻缘绿藻(Myrmecia incisa)系单细胞淡水绿藻,能够大量合成并积累花生四烯酸(arachidonic acid,ArA,20:4ω6),尤其在氮饥饿条件下。基于该绿藻中的延长酶基因序列构建双元表达载体,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导侵染拟南芥(Arabidopisis thaliana),筛选得到携带MiFAE基因的拟南芥转化株。在转基因第3代(T3)植株中应用PCR扩增目的基因片段和GUS染色,分别在DNA、mRNA和表达水平上均成功地检测到MiFAE基因的存在。GC-MS对不同组织甲酯化的脂肪酸进行检测,结果表明,在转基因的拟南芥营养生长期的叶片中,十六碳三烯酸(hexadecaterienoic acid,C16:3^7,10,13)和α-亚麻酸(α-linolenic acid,C18:3^9,12,15,ALA)在总脂肪酸中的百分含量与对照组相比明显下降,分别由10.5%和41.5%降到1.8%和19.6%。结合GUS染色结果,推测这些减少的产物可能通过外源MiFAE基因的作用,直接参与了蜡质或角质的合成代谢途径。

关键词: 缺刻缘绿藻, 花生四烯酸, 脂肪酸延长酶, 农杆菌, 拟南芥

于水燕;陈颢;周志刚;. 缺刻缘绿藻脂肪酸延长酶基因在拟南芥中的表达分析[J]. .

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