糖化酶、木聚糖酶融合蛋白在毕赤酵母中的高效表达

糖化酶、木聚糖酶融合蛋白在毕赤酵母中的高效表达

王智;顿宝庆;顾金刚;赵萱;田谷;路明;李桂英;

中国农业科学院作物科学研究所国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程中国农业科学院生物质能源研究中心;中国农业科学院农业资源与农业区划研究所中国农业微生物菌种保藏管理中心;东北农业大学生命科学学院;

出版日期:2012-01-26 发布日期:2012-01-26
基金资助:
国际先进农业科学与技术项目(农业部“948”项目)(2011-Z09);;

Published:2012-01-26 Online:2012-01-26

摘要/Abstract

摘要： 通过RT-PCR方法,以埃默森篮状菌(Talaromyces emersonii)总RNA为模板,克隆出糖化酶(glucoamylase,amyA)基因的成熟肽编码序列(1 857 bp),编码618个氨基酸;以类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)H10-3基因组DNA为模板,克隆出木聚糖酶(xylanase A,xynA)基因的成熟肽编码序列(636 bp),编码211个氨基酸。通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)得到拼接片段amyA-l-xynA,并将其克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9中,得到重组质粒pPIC9-amyA-l-xynA,重组质粒线性化后经电击转化到毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115中,得到了表达成功的工程菌ALX2。在ALX2发酵上清液中同时检测到糖化酶活性(10.7 U/mL)和木聚糖酶活性(51.8 U/mL)。

关键词: 糖化酶, 木聚糖酶, 融合表达, 毕赤酵母

王智;顿宝庆;顾金刚;赵萱;田谷;路明;李桂英;. 糖化酶、木聚糖酶融合蛋白在毕赤酵母中的高效表达[J]. .

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