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枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)碱性脂肪酶基因在毕赤酵母中的表达

戴苏;赵小兰;林影;韩双艳;   

  1. 华南理工大学生物科学与工程学院;
  • 出版日期:2012-03-26 发布日期:2012-03-26
  • 基金资助:
    广东省工业攻关项目(2008A010900002,2010A010500003)

  • Published:2012-03-26 Online:2012-03-26

摘要: 将来自枯草芽孢杆菌的碱性脂肪酶基因经密码子优化,全基因合成后克隆到pPICZαA载体,构建了pPICZαA-bsl分泌型重组质粒,该重组质粒经限制性内切酶PmeI线性化后使用LiCl法转化到毕赤酵母X-33,经过筛选获得分泌表达碱性脂肪酶的重组毕赤酵母X-33/pPICZαA-bsl。摇瓶发酵液上清酶活最高可达4.78 U/mL,初步研究了该脂肪酶的酶学性质,其最适作用温度为40-60℃,最适pH9.0,且具有高度耐碱的特性。该重组脂肪酶对旧新闻纸具备较明显的脱墨能力。

关键词: 枯草芽孢杆菌, 碱性脂肪酶, 密码子优化, 毕赤酵母, 分泌表达, 脱墨