碱性木聚糖酶产生菌的筛选、XynG1-3基因克隆表达及酶学性质研究

碱性木聚糖酶产生菌的筛选、XynG1-3基因克隆表达及酶学性质研究

郑宏臣;刘逸寒;刘晓光;韩杨;王建玲;路福平;

天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室工业酶国家工程实验室天津市工业微生物重点实验室;

出版日期:2012-10-26 发布日期:2012-10-26
基金资助:
国家自然科学基金项目(31101219)

Published:2012-10-26 Online:2012-10-26

摘要/Abstract

摘要： 从造纸厂周边碱性土壤中分离、筛选到一株产碱性木聚糖酶的细菌G1-3,根据形态和生理、生化特性并结合16SrDNA序列分析,鉴定菌株G1-3为短小芽孢杆菌,命名为Bacillus pumilusG1-3。利用克隆表达载体pET-22b(+),实现了Bacillus pumilusG1-3碱性木聚糖酶基因XynG1-3在E.coliBL21中的表达。经氨基酸序列分析,木聚糖酶XynG1-3属于GH11家族的小分子木聚糖酶。重组木聚糖酶XynG1-3经镍离子亲和层析一步纯化后,获得凝胶电泳条带单一的蛋白样品,经SDS-PAGE检测其分子量为24 kD。对酶学性质进行分析,重组酶XynG1-3最适作用温度为55℃,最适作用pH为8.0;该酶在60℃保温1 h,残余酶活保持为原来的56%,pH作用范围较广,在pH10.0下保存1 h,残余酶活仍能保持75%,为耐碱性木聚糖酶。

关键词: 短小芽孢杆菌, 碱性木聚糖酶, 筛选, 鉴定, 克隆, 表达, 酶学性质

郑宏臣;刘逸寒;刘晓光;韩杨;王建玲;路福平;. 碱性木聚糖酶产生菌的筛选、XynG1-3基因克隆表达及酶学性质研究[J]. .

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