在人胚胎干细胞中高效表达PELO蛋白

生物技术通报 ›› 2013, Vol. 0 ›› Issue (10): 170-176.

在人胚胎干细胞中高效表达PELO蛋白

胡旭林,纪家葵

（清华大学医学院干细胞与再生医学中心，北京 100084）

收稿日期:2013-05-10 修回日期:2013-10-15 出版日期:2013-10-14 发布日期:2013-10-15
作者简介:胡旭林，男，硕士研究生，研究方向：发育生物学；E-mail ：huxulin@139.com
基金资助:
清华大学自主科研计划（2010THZ03）

The Overexpression of PELO in Human Embryonic Stem Cells

Hu Xulin, Kee Kehkooi

（Center for Stem Cell Biology and Regenerative Medicine，School of Medicine，Tsinghua University，Beijing 100084）

Received:2013-05-10 Revised:2013-10-15 Published:2013-10-14 Online:2013-10-15

摘要/Abstract

摘要：

以PELO 全长cDNA 为模板，采用TOPO 克隆的方法，将人的PELO 基因克隆到pENTR-D-TOPO 载体上，形成pENTR-D-PELO 克隆载体。然后通过同源重组将含有EF1α 启动子的pENTR-5’-EF1α 和pENTR-D-PELO 重组到表达载体p2k7 上，形成EF1α-PELO-p2k7 表达载体。将构建好的PELO 高表达载体在293FT 细胞中制备成相应的慢病毒表达载体，并用慢病毒侵染人胚胎干细胞，最终成功实现在人胚胎干细胞中稳定且高效地表达PELO 蛋白。

关键词: PELO, 高表达, 胚胎干细胞, 慢病毒, 同源重组

Abstract:

Using full length human PELO cDNA as template, TOPO cloned PELO gene to pENTR-D-TOPO vector to form the pENTR-D-PELO vector, then performed the MultiSite Gateway LR recombination reaction between pENTR-5’-EF1α and pENTR-D-PELO to get the EF1α-PELO-p2k7 expression vector. PELO overexpression lentivirus was produced in 293FT cells and ransducing human embryonic stem cells to overexpress PELO.

Key words: PELO, Overexpression, Embryonic stem cells, Lentivirus, Homologus recombinant

胡旭林,纪家葵. 在人胚胎干细胞中高效表达PELO蛋白[J]. 生物技术通报, 2013, 0(10): 170-176.

Hu Xulin Kee Kehkooi . The Overexpression of PELO in Human Embryonic Stem Cells[J]. Biotechnology Bulletin, 2013, 0(10): 170-176.

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