毕赤酵母高密度培养表达鸡α-干扰素的工艺研究

生物技术通报 ›› 2014, Vol. 0 ›› Issue (6): 115-119.

毕赤酵母高密度培养表达鸡α-干扰素的工艺研究

姜正军¹, 刘树海¹, 王茂超¹, 程全明¹, 黄金^1，2

（1.山东华辰生物科技有限公司，潍坊 261061；2.浙江工业大学药学院，杭州 310014）

收稿日期:2013-12-03 出版日期:2014-06-25 发布日期:2014-06-25
作者简介:姜正军，男，硕士，高级工程师，研究方向：蛋白类药物；E-mail：sinostar5555@gmail.com
基金资助:
山东省2011年科技发展计划资助项目（2011GGH22109）

The Improvement of Chicken Alpha Interferon Expression by a Recombinant Pichia pastoris with Cultural Condition Optimization

Jiang Zhengjun¹,Liu Shuhai¹,Wang Maochao¹,Cheng Quanming¹,Huang Jin^1，2

（1. Shandong Huachen Bio-tech Co.，Ltd，Weifang 261061； 2. College of Pharmaceutical Science，Zhejiang University of Technology，Hangzhou 310014）

Received:2013-12-03 Published:2014-06-25 Online:2014-06-25

摘要/Abstract

摘要： 考察了10 L罐规模条件下pH、温度、装液量以及碳源流加模式对毕赤酵母高密度培养表达鸡α-干扰素的影响，确定了最优的生产工艺：在pH5.5、28℃、40%装液量条件下，当初始碳源耗尽的情况下，进行甘油和甲醇混合（流加体积速率比为20∶1）脉冲流加，产物鸡α-干扰素抗病毒活性最高，可达3×10⁶ IU/mL。将该工艺在50 L发酵罐规模条件下进行放大，重复20批，结果表明此过程重复性较好，且目的蛋白表达量稳定，具有工业化生产的实际应用价值。

关键词: 毕赤酵母, 鸡α-干扰素, 优化, 放大

Abstract: To achieve excellent performance of Pichia pastoris for chicken alpha interferon expression, pH value, temperature, culture volume and carbon source feeding pattern were optimized. The maximum anti-virus activity（3×10⁶ IU/mL）was harvested in the conditions of pH5.5, 28℃, and 40% culture volume in 10 L fermentor, as well as the glycerol-methanol（20∶1, V/V）co-feeding pattern was conducted when carbon source exhausted. This process was successfully scaled up to 50 L fermentor and the fermentation performance was also steady, which could be taken advantage of for its industrial application.

Key words: Pichia pastoris, Chicken alpha interferon, Optimization, Up-scale

姜正军, 刘树海, 王茂超, 程全明, 黄金. 毕赤酵母高密度培养表达鸡α-干扰素的工艺研究[J]. 生物技术通报, 2014, 0(6): 115-119.

Jiang Zhengjun,Liu Shuhai,Wang Maochao,Cheng Quanming,Huang Jin. The Improvement of Chicken Alpha Interferon Expression by a Recombinant Pichia pastoris with Cultural Condition Optimization[J]. Biotechnology Bulletin, 2014, 0(6): 115-119.

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