肺炎链球菌SPD1587蛋白的表达纯化及晶体生长研究

doi:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.035

生物技术通报 ›› 2015, Vol. 31 ›› Issue (7): 226-230.doi: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.035

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肺炎链球菌SPD1587蛋白的表达纯化及晶体生长研究

黄健¹, 黄美容², 骆诗露¹, 朱杰华¹, 闵迅¹

(1.遵义医学院附属医院医学检验科，遵义 563003；2.遵义医学院附属医院输血科，遵义 563003)

收稿日期:2015-03-26 出版日期:2015-07-16 发布日期:2015-07-16
作者简介:黄健，男，硕士，研究方向：细菌致病分子机制研究；E-mail：81537648@qq.com
基金资助:
国家自然科学基金项目(81460317)，贵州省社会发展公关计划(2012GZ83293)

Expression, Purification, Crystallization of SPD1587 Protein from Streptococcus pneumoniae

Huang Jian¹, Huang Meirong², Luo Shilu¹, Zhu Jiehua¹, Min Xun¹

(1. Department of Laboratory Medicine，Affiliated Hospital of Zunyi Medical College，Zunyi 563003；2.Department of Blood Transfusion，Affiliated Hospital of Zunyi Medical College，Zunyi 563003)

Received:2015-03-26 Published:2015-07-16 Online:2015-07-16

摘要/Abstract

摘要： SPD1587蛋白是肺炎链球菌D39菌株中的一种转录因子，其在鼻咽部定植和肺部感染过程中发挥着重要作用。生物信息学分析提示其具有与A群链球菌的转录因子Mga蛋白相似的结构，目前其三维结构尚未被解析。成功构建了SPD1587蛋白的全长表达载体PET28a-spd1587，利用大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行原核表达，获得了以可溶形式表达的目的蛋白。经Ni-NTA柱亲和层析及DEAE阴离子交换层析纯化后，获得了高纯度的目的蛋白。采用悬滴气相扩散法获得了SPD1587蛋白晶体。

关键词: 肺炎链球菌, SPD1587蛋白, 原核表达, 晶体生长

Abstract: SPD1587 protein is a transcription factor of streptococcus pneumoniae D39 strains, which plays an important role in nasopharyngeal colonization and lung infection. It has a conserved domain that was similar to transcription factors Mga of group A streptococcus, but the protein three-dimensional structure is unclear. In this study, the protein expression vector of PET28a-spd1587 was successfully constructed and a soluble form of SPD1587 protein was acquired in Escherichia coli BL21(DE3)strain. High purity SPD1587 protein was obtained by Ni-NTA affinity chromatography and DEAE negative ion exchange chromatography. The crystal of SPD1587 protein was obtained by the vapor diffusion method.

Key words: Streptococcus pneumoniae, SPD1587 protein, prokaryotic expression, crystal grow

黄健, 黄美容, 骆诗露, 朱杰华, 闵迅. 肺炎链球菌SPD1587蛋白的表达纯化及晶体生长研究[J]. 生物技术通报, 2015, 31(7): 226-230.

Huang Jian, Huang Meirong, Luo Shilu, Zhu Jiehua, Min Xun. Expression, Purification, Crystallization of SPD1587 Protein from Streptococcus pneumoniae[J]. Biotechnology Bulletin, 2015, 31(7): 226-230.

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肺炎链球菌SPD1587蛋白的表达纯化及晶体生长研究

Expression, Purification, Crystallization of SPD1587 Protein from Streptococcus pneumoniae

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