刺五加细胞色素P450 基因的克隆与表达分析

生物技术通报 ›› 2014, Vol. 0 ›› Issue (1): 112-115.

刺五加细胞色素P450 基因的克隆与表达分析

邢朝斌,吴鹏,李非非,刘岩,周秘,修乐山

河北联合大学生命科学学院，唐山 063000

收稿日期:2013-09-18 出版日期:2014-01-23 发布日期:2014-01-23
作者简介:邢朝斌，男，副教授，研究方向: 分子生药学、药用植物细胞工程；E-mail: xzbheuu@126.com
基金资助:
国家自然科学基金项目(30701086)，河北省自然科学基金项目(C2009001252)，河北省自然科学基金-石药集团医药联合研究基金项目(H2012401006)，河北联合大学培育基金项目(GP201306)

Cloning and Expression Analysis of Cytochrome P450 Gene in Eleutherococcus senticosus

Xing Zhaobin, Wu Peng, Li Feifei, Liu Yan, Zhou Mi, Xiu Leshan

College of Life Science，Hebei United University，Tangshan 063000

Received:2013-09-18 Published:2014-01-23 Online:2014-01-23

摘要/Abstract

摘要： 根据已报道的人参、三七等植物的细胞色素P450(Cytochrome P450，P450)基因的cDNA 序列设计引物，利用#br#RT-PCR 法克隆刺五加P450 基因的cDNA 全长序列，并分析其在不同生长发育时期和器官中的表达情况。结果显示，克隆了全长#br#为1 410 bp 的刺五加P450 基因的cDNA 序列，该基因编码469 个氨基酸残基组成的蛋白质。GenBank 登录号为KF498590，与人参、#br#三七的P450 氨基酸序列一致性分别为91.5% 和90.4%。刺五加的P450 基因在不同生长发育时期和器官中均有表达，但表达量具#br#有显著差异(P<0.05)。最大表达量出现在盛花期，为最低表达量(萌芽期)的1.26 倍。各器官中，叶片的表达量最高，是最低量#br#幼茎的1.49 倍。

关键词: 刺五加, 细胞色素P450, 克隆, 表达分析

Abstract: In order to clone cytochrome P450(P450)in Eleutherococcus senticosus, the primers were designed according to cDNA of the reported Panax ginseng and P. notoginseng. The full length cDNA of the E. senticosus P450 was cloned by RT-PCR, and analyzed the expression of P450 in different growth periods and organs of E. senticosus. The results showed that the full length of P450 was 1 410 bp, encoded a protein with 469 amino-acid residues, GenBank accession number KF498590. To compare the amino acid sequence of E.senticosus P450 with P. ginseng and P. notoginseng, the amino acid homology was 91.5% and 90.4%. P450 expressed in different growth periods and organs of E. senticosus, and the expression amount differed significantly(P<0.05). The highest content of the expression showed up when full opening flower stage, which was 1.26 times as much as that in the lowest at germination stage. The highest content of the expression was in the leaves which was 1.49 times as much as that of the lowest in young stem.

邢朝斌,吴鹏,李非非,刘岩,周秘,修乐山. 刺五加细胞色素P450 基因的克隆与表达分析[J]. 生物技术通报, 2014, 0(1): 112-115.

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