miR-124靶向TNF-α促进猪皮下脂肪细胞分化

doi:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017.03.025

生物技术通报 ›› 2017, Vol. 33 ›› Issue (3): 175-179.doi: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017.03.025

miR-124靶向TNF-α促进猪皮下脂肪细胞分化

李虹仪¹, 李家标¹, 郑艺林¹, 吉卢琳¹, 张茂¹, 郑恩琴²

1. 龙岩学院生命科学学院动物营养科研创新团队,龙岩 364012;
2. 华南农业大学广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室,广州 510642

收稿日期:2016-08-02 出版日期:2017-03-26 发布日期:2017-03-07
作者简介:李虹仪,女,讲师,研究方向：动物营养生理与生物化学;E-mail：politician_137@163.com
基金资助:
福建省大学生创新创业训练计划项目（201511312055）,福建省自然科学基金项目（2014J05043）,龙岩学院博士启动基金项目（LB2013012）

miR-124 Regulates Porcine Adipocyte Differentiation Trough Targeting TNF-α

LI Hong-yi¹, LI Jia-biao¹, ZHENG Yi-lin¹, JI Lu-lin¹, ZHANG Mao¹, ZHENG En-qin²

1.Animal Nutrition Scientific Research Innovation Team,College of Life Science,Longyan University,Longyan 364012;
2.Guangdong Provincial Key Lab of Agro-animal Genomics and Molecular Breeding, South China Agricultural University, Guangzhou 510642

Received:2016-08-02 Published:2017-03-26 Online:2017-03-07

摘要/Abstract

摘要： 前期研究中采用双萤光素酶报告基因验证了miR-124与脂解因子猪TNF-α之间的靶关系,以此为基础研究miR-124是否影响猪皮下脂肪细胞的分化。采用miR-124 模拟物mimics和抑制物inhibitor 分别转染猪脂肪前体细胞并诱导其分化成成熟脂肪细胞,检测细胞的聚脂情况,甘油及甘油三酯的含量变化,荧光定量检测脂肪细胞关键转录因子PPARγ,脂肪合成和分解的主要酶FASN和HSL基因的表达变化。结果显示,过表达miR-124 能抑制TNF-α蛋白的表达,脂肪细胞脂滴多于对照组,甘油三酯（TG）含量显著增加（P<0.01）,甘油含量亦显著增加（P<0.05）,PPARγ、FASNT和HSL的表达显著上调（P<0.01）;抑制细胞miR-124的表达脂滴则较少,TG含量显著减少（P<0.05）,PPARγ和FASN的表达均显著下调（P<0.05）。miR-124可能通过抑制TNF-α调节猪脂肪细胞的分化,为后续研究miR-124调节脂肪代谢的相关机制奠定基础。

关键词: miR-124, 猪, 脂肪分化, TNF-α

Abstract: In the previous research,porcine TNF-α was found to be the target of miR-124 by dual luciferase assay. Here we verify whether miR-124 has the effect on the differentiation of porcine adipocyte. Porcine pre-adipocyte was transfected with miR-124 mimics or inhibitor to over-express or to repress miR-124,and then induced into mature adipocytes. The accumulation of lipid droplets was observed using Oil Red O staining and the amount of glycerol and triglycerides（TG）were detected by TG assay and glycerol assay. The expressions of PPARγ（proliferator-activated receptor-γ）,FASN（fatty acid synthase）,and HSL（hormone-sensitive lipase）were detected by real time fluorescence quantitative PCR. The result showed that overexpression of miR-124 repressed the expression of TNF-α protein,therefore,lipid droplets were more than that in the control,TG increased significantly（P < 0.01）,also the same for glycerol（P < 0.05）,and the expressions of PPARγ,FASNT,and HSL significantly up-regulated（P < 0.01）. Repressing miR-124 resulted in the reduction of lipid droplets and the significant decrease of TG,and the expressions of PPARγ and FASNT significantly down-regulated（P < 0.05）. In conclusion,miR-124 might regulate the differentiation of porcine adipocyte by suppressing TNF-α,laying a foundation for future studies on the mechanism of miR-124 regulating lipid metabolism.

Key words: miR-124, porcine, adipocyte differentiation, TNF-α

李虹仪, 李家标, 郑艺林, 吉卢琳, 张茂, 郑恩琴. miR-124靶向TNF-α促进猪皮下脂肪细胞分化[J]. 生物技术通报, 2017, 33(3): 175-179.

LI Hong-yi, LI Jia-biao, ZHENG Yi-lin, JI Lu-lin, ZHANG Mao, ZHENG En-qin. miR-124 Regulates Porcine Adipocyte Differentiation Trough Targeting TNF-α[J]. Biotechnology Bulletin, 2017, 33(3): 175-179.

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miR-124靶向TNF-α促进猪皮下脂肪细胞分化

miR-124 Regulates Porcine Adipocyte Differentiation Trough Targeting TNF-α

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