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纳米金基因芯片结合通用PCR同时检测多个病原性真菌

鲁卫平;涂植光;   

  1. 重庆医科大学检验医学系;第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心;
  • 出版日期:2009-03-26 发布日期:2009-03-26
  • 基金资助:
    重庆市自然基金(CSTC,2007BB5080);; 军队医药卫生科研基金课题(06G073)

  • Published:2009-03-26 Online:2009-03-26

摘要: 基于致病性真菌rDNA基因分型技术,构建采用通用引物的一次PCR法,并结合纳米金新型基因芯片检测系统实现一次对多个临床常见致病性酵母菌的检测分析。用生物素标记的通用引物扩增各真菌DNA片段并与基因芯片杂交,然后将链酶亲和素标记的纳米金结合到杂交体上,杂交信号通过银染反应被放大形成裸眼可见的显色信息。结果表明,通用引物可扩增临床常见的真菌DNA,选用的各探针特异性强、可靠性好,芯片的最低检测值达50 fmol/L。临床样品检测结果与常规鉴定方法结果一致。该技术检测时间短、操作简单、不需要特殊设备,能部分满足临床检测的通量要求,具有很好的临床应用前景。

关键词: 纳米金, 基因芯片, 聚合酶链反应, 真菌