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小麦叶片胞间洗脱液的蛋白质组学检测分析

胡新明;杨友才;潘映红;   

  1. 湖南农业大学生物科学技术学院;中国农业科学院作物科学研究所国家农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程;
  • 出版日期:2011-08-26 发布日期:2011-08-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(30971874)

  • Published:2011-08-26 Online:2011-08-26

摘要: 植物叶片胞间液蛋白主要是一些低丰度蛋白,其中某些种类在植物抗病反应中起着重要的作用。通过改进已有的技术方法,结合超滤和丙酮沉淀处理,从500 g抗条锈病近等基因系小麦Taichung29*6/Yr5的叶片中获得了1.5 mg可溶性的胞间洗脱液蛋白。SDS-PAGE电泳分析显示,胞间洗脱液蛋白样品和总蛋白样品存在着明显的差异。进一步的双向电泳分析证实,两个样品在胶图上可分别检测到1 241±59(n=3)和1 849±138(n=3)个蛋白点,其中胞间洗脱液样品有1 042±47(n=3)个不同于总蛋白样品的蛋白点,与总蛋白样品共有的蛋白点仅198±13(n=3)个。随意取100个差异蛋白点进行MALD I-TOF质谱分析,鉴定到一些已被确证存在于小麦胞间液中的蛋白质,如-β1,3-葡聚糖酶、葡聚糖--βD-1,3-葡萄糖苷内切酶、几丁质酶、过氧化物酶等。从蛋白质组学角度初步分析了小麦叶片胞间洗脱液的组成,为进一步探索小麦叶片胞间液中低丰度蛋白的抗病功能提供依据。

关键词: 小麦, 叶片, 胞间洗脱液, 蛋白质组学, 双向电泳