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拟南芥转录因子NF-YC的原核表达及多克隆抗体制备

卫静;李长江;刘亚静;黄桂雪;张凌云;   

  1. 北京林业大学森林培育与保护教育部重点实验室;
  • 出版日期:2012-03-26 发布日期:2012-03-26
  • 基金资助:
    国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2009ZX08009-062B)

  • Published:2012-03-26 Online:2012-03-26

摘要: 采用PCR方法扩增NF-YC基因得到其全长cDNA序列,并将其克隆至原核表达载体pET-48b中,在大肠杆菌BL21中用IPTG诱导出分子量约为45 kD的融合蛋白,SDS-PAGE和Western blotting检测鉴定表达产物。利用亲和层析技术对融合蛋白进行纯化,纯化后的目的蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体。间接ELISA检测抗体效价大于1 62 500,Western blotting结果显示,该抗体可特异性识别NF-YC蛋白。

关键词: 拟南芥, 转录因子, NF-YC融合蛋白, 原核表达, 多克隆抗体