农杆菌介导的大豆萌发种子转化技术

生物技术通报 ›› 2013, Vol. 0 ›› Issue (8): 83-87.

农杆菌介导的大豆萌发种子转化技术

刘志敏¹, 熊鹤雯¹, 谢皓¹, 秦玉涛², 赵嫣然², 郭蓓²

（1.北京农学院植物科学技术学院，北京 102206；2. 北京农学院生物科学与工程学院，北京 102206）

收稿日期:2013-03-05 修回日期:2013-08-11 出版日期:2013-08-11 发布日期:2013-09-02
作者简介:刘志敏，女，硕士研究生，研究方向：大豆分子育种；E-mail：zhimin2005104@126.com
基金资助:
国家高技术研究发展计划“863”项目（2012AA101106）

The Technique for Agrobacterium-mediated Transformation via Germinating Seeds of Soybean

Liu Zhimin¹, Xiong Hewen¹, Xie Hao¹, Qin Yutao², Zhao Yanran², Guo Bei²

（1. College of Plant Science and Technology，Beijing University of Agriculture，Beijing 102206；2. College of Biological Science and Engineering，Beijing University of Agriculture，Beijing 102206）

Received:2013-03-05 Revised:2013-08-11 Published:2013-08-11 Online:2013-09-02

摘要/Abstract

摘要： 采用农杆菌介导的萌发种子侵染法，开展大豆遗传转化技术研究。以萌发大豆的生长点、子叶节、下胚轴3处为外植体，将带有抗除草剂草甘膦基因EPSPS及草丁膦抗性筛选基因Bar的质粒借助农杆菌介导转入大豆中，通过共培养及盆栽种植获得转化体。经过对T₀代和T₁代植株进行双重PCR检测以及两种除草剂的抗性鉴定得到转基因阳性株。试验结果表明，通过农杆菌介导的萌发种子转化法已将抗两种除草剂基因成功的转入大豆中，其综合转化率约为0.37%。

关键词: 农杆菌, 萌发种子, 大豆, 遗传转化

Abstract: Germination seeds were used to research the genetic transformation technology of Agrobacterium-mediated in soybean. The growing point, cotyledon node and hypocotyl of germination seed were used as explants, and the plasmid that carried with the resistance to the herbicide glyphosate gene EPSPS and glufosinate resistance screening gene Bar was transferred to soybean by Agrobacterium-mediated. Transformants were obtained by co-culture and potted plant growing. After the double PCR detection as well as the two herbicide resistance identification of transgenic T₀ and T₁ plants, the positive strains were acquired. The experiment results showed that two genes resistance to herbicides have been successfully transferred to soybean via germinated seeds by Agrobacterium-mediated transformation method, with the transformation rate of approximately 0.37%.

Key words: Agrobacterium, Germinating seed, Soybean, Transformation

引用本文

刘志敏, 熊鹤雯, 谢皓, 秦玉涛, 赵嫣然, 郭蓓. 农杆菌介导的大豆萌发种子转化技术[J]. 生物技术通报, 2013, 0(8): 83-87.

Liu Zhimin, Xiong Hewen, Xie Hao, Qin Yutao, Zhao Yanran, Guo Bei. The Technique for Agrobacterium-mediated Transformation via Germinating Seeds of Soybean[J]. Biotechnology Bulletin, 2013, 0(8): 83-87.

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