甘草悬浮细胞肉桂酸-4-羟基化酶（C4H）基因的克隆及表达分析

doi:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0466

生物技术通报 ›› 2017, Vol. 33 ›› Issue (11): 96-100.doi: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0466

甘草悬浮细胞肉桂酸-4-羟基化酶（C4H）基因的克隆及表达分析

邹广平, 李雅丽, 冯梦薇, 杨修, 许智伟

内蒙古科技大学生命科学与技术学院,包头 014010

收稿日期:2017-06-05 出版日期:2017-11-26 发布日期:2017-11-22
作者简介:邹广平,女,硕士研究生,研究方向：药用植物生物技术;E-mail：binghuanziyi@163.com
基金资助:
国家自然科学基金项目（31460064）,内蒙古自然科学基金项目（2017MS（LH）0304）,内蒙古高等学校“青年科技英才计划”（NJYT-15-A08）,内蒙古科技大学科研仪器专项（2015KYYQ03）

Cloning and Expression Analysis of Cinnamate 4-hydroxylase Gene from Glycyrrhiza uralensis Suspension Cultured Cells

ZOU Guang-ping, LI Ya-li, FENG Meng-wei, YANG Xiu, XU Zhi-wei

School of Life Science and Technology,Inner Mongolia University of Science and Technology,Baotou 014010

Received:2017-06-05 Published:2017-11-26 Online:2017-11-22

摘要/Abstract

摘要： 根据已报道的刺甘草C4H基因序列（GenBank ID：D87520.1）,采用RT-PCR技术克隆得到乌拉尔甘草悬浮细胞的C4H基因编码区序列,并对其进行生物信息学分析。另外,采用q-PCR方法对C4H基因受茉莉酸甲酯（Methyl jasmonate,MeJA）诱导后的表达模式进行分析。所克隆的C4H基因编码区开放阅读框（Opening reading frame,ORF）长为1 515 bp,编码504 个氨基酸。q-PCR实验证明C4H基因受MeJA的诱导,在悬浮体系添加MeJA后12 h达到最高表达水平。

关键词: 肉桂酸-4-羟化酶, 甘草细胞, 茉莉酸甲酯, 表达分析

Abstract: According to the reported C4H（cinnamate 4-hydroxylase）gene sequence（GenBank accession ID：D87520.1）from Glycyrrhiza echinata,the coding sequence of C4H gene from Glycyrrhiza uralensis Fisch suspension cultured cells was obtained by RT-PCR cloning technology,and the bioinformatics analysis on it was carried out. In addition,the expression patterns of C4H gene induced by methyl jasmonate（MeJA）were analyzed by q-PCR. The length of the cloned C4H’s open reading frame（ORF）was 1 515 bp,encoding 504 amino acids. The q-PCR experiments showed that C4H gene was induced by MeJA and reached the highest expression level at 12 h after MeJA added into the cell suspension system.

Key words: cinnamate 4-hydroxylase, licorice cells, methyl jasmonate, expression analysis

邹广平, 李雅丽, 冯梦薇, 杨修, 许智伟. 甘草悬浮细胞肉桂酸-4-羟基化酶（C4H）基因的克隆及表达分析[J]. 生物技术通报, 2017, 33(11): 96-100.

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甘草悬浮细胞肉桂酸-4-羟基化酶（C4H）基因的克隆及表达分析

Cloning and Expression Analysis of Cinnamate 4-hydroxylase Gene from Glycyrrhiza uralensis Suspension Cultured Cells

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