跨膜蛋白AgrCTM6-7C分离纯化方法的优化

doi:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.07.009

生物技术通报 ›› 2016, Vol. 32 ›› Issue (7): 59-65.doi: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.07.009

跨膜蛋白AgrC_TM6-7C分离纯化方法的优化

王路路^{1, 2}, 权春善², 许永斌², 王冠天², 刘爽², 陈莹²

1. 大连工业大学,大连 116000；
2. 大连民族大学生命科学学院大连民族大学生物技术与资源利用国家民委-教育部重点实验室,大连 116605

收稿日期:2015-10-30 出版日期:2016-07-25 发布日期:2016-07-25
作者简介:王路路,女,硕士研究生,研究方向：细菌双组份信号转导系统;E-mail：wanglulu0813@126.com
基金资助:
国家自然科学基金项目（21272031）,中央高校基本科研基金（DC201502020201）

Optimization of the Purification Method for Transmembrane Protein AgrC_TM6-7C

WANG Lu-lu^{1, 2}, QUAN Chun-shan², XU Yong-bin², WANG Guan-tian², LIU Shuang², CHEN Ying²

1. School of Biological Engineering,Dalian Polytechnic University,Dalian 116000;
2. Key Laboratory of Biotechnology and Resource Utilization,State Ethnic Affairs Commission and Ministry of Education,Department of Life Science,Dalian Nationalities University,Dalian 116605

Received:2015-10-30 Published:2016-07-25 Online:2016-07-25

摘要/Abstract

摘要： 旨在通过优化AgrC_TM6-7C蛋白的纯化过程,获得高纯度的目的蛋白,为后续研究提供材料。详细探讨了金属离子螯合层析缓冲液中咪唑浓度、离子交换层析缓冲液的pH值对AgrC_TM6-7C蛋白纯化效果的影响,并研究了β-巯基乙醇对AgrC_TM6-7C蛋白聚集及其激酶活性的影响。经过优化后,在不影响AgrC_TM6-7C蛋白激酶活性的前提下,AgrC_TM6-7C蛋白在浓度和纯度上均有明显提高,纯度可达98%以上,产量可达15 mg/L。

关键词: 金黄色葡萄球菌, AgrCTM6-7C, 纯化

Abstract: The core objective of this paper is to obtain the protein of AgrC_TM6-7Cwith high purity by optimizing the purification processes,and provide the materials for further research. We investigated the influence of imidazole concentration in buffer used in the metal ion affinity chromatography and buffer with different pH used in the ion exchange chromatography on the purification of AgrC_TM6-7C. Moreover,we discussed the effects of β-Mercaptoethanol on protein aggregation and kinase activity of AgrC_TM6-7C. The optimized purification method resulted in the obvious increase on the yield and purity of AgrC_TM6-7C,producing 15 mg with about 98% purity from one-liter culture medium.

Key words: Staphylococcus aureus, AgrCTM6-7C, purification

王路路, 权春善, 许永斌, 王冠天, 刘爽, 陈莹. 跨膜蛋白AgrC_TM6-7C分离纯化方法的优化[J]. 生物技术通报, 2016, 32(7): 59-65.

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