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CALA在毕赤酵母中的表达、纯化及酶学特性研究

严慧玲;蓝东明;王永华;杨博;   

  1. 华南理工大学轻工与食品学院;华南理工大学生物科学与工程学院;
  • 出版日期:2011-06-26 发布日期:2011-06-26
  • 基金资助:
    酶工程关键技术研究与产业(2009A1-E021)

  • Published:2011-06-26 Online:2011-06-26

摘要: 将南极假丝酵母脂肪酶A(cala)基因克隆至组成型表达载体pGAPZαA中,电激转入X-33,获得高效表达的CALA酵母工程菌株。发酵液上清经超滤浓缩、硫酸铵沉淀和阴离子交换层析等步骤,获得纯化的重组CALA,其比酶活达384.90 U/mg。该酶最适温度为70℃,最适pH值为8.0。经50℃保温2 h,仍含有60%水解酶活力;在pH7.0和8.0溶液中比较稳定。经DMSO处理1 h,仍保持90%的活性;非离子型表面活性剂能提高CALA的酶活,金属离子在不同程度上抑制CA-LA的酶活。

关键词: 南极假丝酵母脂肪酶A, 毕赤酵母, 组成型表达, 纯化, 酶学性质