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环介导恒温扩增法快速检测短小芽孢杆菌

应琪;李太武;苏秀榕;李晔;周君;崔静;王中华;李松伟;   

  1. 宁波大学生命科学与生物工程学院;宁波城市职业技术学院;
  • 出版日期:2011-02-26 发布日期:2011-02-26
  • 基金资助:
    海洋公益性行业科研专项(2011418007);; 宁波大学研究生科研创新基金项目(NG09JLA024)

  • Published:2011-02-26 Online:2011-02-26

摘要: 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)是一种能引起食源性疾病的腐败菌,对其进行快速检测具有重要意义。针对短小芽孢杆菌木聚糖(xynA)基因,设计了4条特异性引物(两条内引物和两条外引物),通过条件优化,首次将一种新颖的核酸扩增技术——环介导恒温扩增技术应用于短小芽孢杆菌的快速检测。采用该技术,63℃温育1h的条件下扩增短小芽孢杆菌DNA,琼脂糖凝胶电泳得到特异性梯度条带。PCR和LAMP的检测灵敏度分别约为162和16.2拷贝每反应。结果表明,该方法检测短小芽孢杆菌特异性强、灵敏度高、操作简便、检测成本低,1h即可完成,有望发展成为快速检测短小芽孢杆菌的有效手段。

关键词: 短小芽孢杆菌, 环介导恒温扩增技术(LAMP), 木聚糖(xynA)基因, 快速检测